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文檔簡介
1、目的:
探討Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A在小鼠心臟二次移植急性排斥反應(yīng)中的作用。
方法:
構(gòu)建小鼠心臟二次移植模型:初次移植,以Balb/c小鼠為供鼠,C57BL/6小鼠為受鼠,進(jìn)行腹部心臟移植;二次移植,以同種Balb/c小鼠為供鼠,初次移植后存活的C57BL/6小鼠為受鼠,進(jìn)行二次頸部心臟移植。然后經(jīng)不同步驟處理,分為四組進(jìn)行實驗:對照組:初次腹部心臟移植存活小鼠,于初次腹部心臟移植2w后行二次頸
2、部心臟移植,同時予腹腔注射與其他組同劑量的生理鹽水處理;實驗組A,初次腹部心臟移植存活小鼠,于初次腹部心臟移植2w后行心臟二次頸部移植,同時予腹腔注射與其他組同劑量的環(huán)孢素A處理(n=6);實驗組B,初次腹部心臟移植存活小鼠,于初次腹部心臟移植2w后行心臟二次頸部移植,同時予腹腔注射與其他組同劑量的Anti-RANTES處理(n=6);實驗組C,初次腹部心臟移植存活小鼠,于初次腹部心臟移植2w后行心臟二次頸部移植,同時予腹腔混合注射與其
3、他組同劑量的環(huán)孢素A和Anti-RANTES處理(n=6)。觀察四組二次移植心臟存活時間;HE染色組織病理學(xué)改變觀察各組異位心臟急性排斥反應(yīng)的程度;Q-PCR檢測二次心臟移植物中RANTES、IFN-γ、IL-2、IL-10和TGF-β基因的相對表達(dá)量;ELISA檢測RANTES、IFN-γ、IL-2、IL-10和TGF-β在受鼠血清中的濃度。
結(jié)果:
在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組,移植心臟的存活時間可
4、達(dá)8.58±0.24天,而在對照組、Anti-RANTES組和應(yīng)用環(huán)孢素A組,移植心臟的存活時間分別為(3.1±0.43)、(5.2±0.26)和(5.58±0.20)天(P<0.01);心臟移植物HE染色可見,在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組,其炎癥細(xì)胞的浸潤較對照組、單用Anti-RANTES實驗組A、單環(huán)孢素A實驗組B明顯減少(P<0.01);Q-PCR的結(jié)果提示,移植心臟內(nèi)RANTES、IL-2、INF-γ的mRNA表
5、達(dá)在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組較其他組明顯減少,而移植心臟內(nèi)IL-10、TGF-βmRNA的表達(dá)在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組較其他組明顯增加(P<0.01);ELISA的結(jié)果提示,移植心臟內(nèi)RANTES、IL-2、INF-γ的血清濃度在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組較其他組明顯減少,而移植心臟內(nèi)IL-10、TGF-β血清濃度在Anti-RANTES聯(lián)合環(huán)孢素A實驗組較其他組明顯增加(P<0.01)。
6、
結(jié)論:
CC族趨化因子配體5(CCL5)RANTES,在小鼠二次心臟移植免疫排斥的誘發(fā)和發(fā)展過程中,起著至關(guān)重要的作用。單用可以Anti-RANTES 或者環(huán)孢素A都可以有效抑制二次心臟移植的急性排斥反應(yīng),減輕炎癥細(xì)胞向移植物聚集、減輕移植物中炎癥細(xì)胞因子RANTES、IL-2、INF-γ的分泌而增加抗炎細(xì)胞因子IL-10、TGF-β的分泌,從而延長二次移植物的存活時間。但聯(lián)合應(yīng)用Anti-RANTES和
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