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文檔簡介
1、目的:研究振動對體外培養(yǎng)IgA腎病和慢性扁桃體炎患者腭扁桃體單個核細胞產(chǎn)生BAFF、IgA1及其異常糖基化的影響。
方法:收集14例IgA腎病組(IgA nephropathy,IgAN組)患者和12例慢性扁桃體炎組(Chronic tonsillitis,CT組)患者腭扁桃體組織,其中慢性扁桃體炎組包括睡眠呼吸暫停綜合征患者,本組均無尿檢異常及腎臟病變。分離人腭扁桃體單個核細胞,培養(yǎng)24小時以穩(wěn)定細胞恢復細胞活性狀態(tài),然后分
2、為6組進行實驗。A組直接分離培養(yǎng)上清及留取細胞作為基礎值,B組不給予振動刺激作為對照組,C組給予1分鐘振動刺激,D組給予3分鐘振動刺激,E組給予5分鐘振動刺激,F(xiàn)組給予10分鐘振動刺激,B~F組繼續(xù)培養(yǎng)72小時后收集培養(yǎng)上清及細胞。用ELISA法檢測培養(yǎng)上清中IgA1蛋白的含量及異常糖基化IgA1的水平,Real time-PCR檢測細胞B淋巴細胞刺激因子(B-cell-activation factor,BAFF) BAFF、β1,3
3、-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶(coreβ1,3-galactosyltrans ferase,C1GALT1)、分子伴侶(coreβ1,3GalT-specific molecular chaperone,Cosmc)的基因表達,分別比較振動對IgAN組和CT組的影響以及不同振動時間的差異。
結(jié)果:
1.未給予振動刺激時,IgAN組患者腭扁桃體單個核細胞IgA1含量、異常糖基化IgA1的水平和BAFF mRNA的表達水平均高于C
4、T組,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.001); IgAN組患者腭扁桃體單個核細胞C1GALT1和Cosmc mRNA的表達水平均低于CT組,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.001)。
2.IgAN組患者腭扁桃體單個核細胞經(jīng)振動刺激后,IgA1含量、異常糖基化IgA1的水平和BAFF mRNA的表達水平均高于未刺激組,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05),C1GALT1和CosmcmRNA的表達水平低于未刺激組,差異有統(tǒng)計學意義(p值均<0.
5、05)。CT組患者腭扁桃體單個核細胞經(jīng)振動刺激后,BAFF mRNA的表達水平升高(p<0.05),但IgA1含量、異常糖基化IgA1的水平及C1GALT1和CosmcmRNA的表達水平無明顯差異(p>0.05)。
3.給予振動刺激1分鐘后,IgAN組和CT組腭扁桃體單個核細胞BAFF基因的表達均有一定程度的升高,且升高程度無差異,這種升高可引起IgAN組IgA1分泌的增加,而CT組IgA1分泌無變化。隨著振動時間的延長,CT
6、組BAFF的表達不再升高,且IgA1含量無變化,而IgAN組BAFF的表達再次明顯升高,且升高程度大于CT組,IgA1的分泌也顯著增加。但IgAN組腭扁桃體單個核細胞C1GALT1和Cosmc mRNA的表達在不同時間振動刺激各組間無明顯差異。
4.Pearson相關性分析顯示:IgAN組腭扁桃體單個核細胞C1 GALT1和Cosmc mRNA表達量與IgA1異常糖基化水平均呈負相關關系(r=-0.5867,p=0.001;r
7、=-0.5031,p=0.003),BAFF mRNA的表達量與IgA1含量呈正相關關系(r=0.5037,p=0.012)。
結(jié)論:給予體外培養(yǎng)的人腭扁桃體單個核細胞振動刺激,可導致IgAN組和CT組BAFF基因的表達升高,振動超過1分鐘后IgAN組BAFF升高的程度大于CT組。IgAN組振動可引起IgA1分泌增加,并通過抑制C1GALT1和Cosmc的基因表達來干擾IgA1的糖基化過程,使IgA1異常糖基化水平升高,即Ig
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