益氣養(yǎng)陰活血方對(duì)糖尿病大鼠血清內(nèi)皮脂肪酶EL水平的影響.pdf

1、目的:該實(shí)驗(yàn)通過(guò)腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)造糖尿病大鼠模型，并應(yīng)用益氣養(yǎng)陰活血方對(duì)成模的糖尿病大鼠進(jìn)行治療，觀察該藥對(duì)糖尿病大鼠的血糖、血脂、內(nèi)皮脂肪酶(EL)和大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮組織形態(tài)的影響，研究本方對(duì)成模糖尿病大鼠大血管病變的治療作用及可能的致病機(jī)制。
　　方法:選用雄性的清潔級(jí)wistar大鼠50只，體重230g～250g，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)4天后，采用完全隨機(jī)法將50只大鼠分為5組:正常組(N)6只，模型組(M)、中藥組

2、（益氣養(yǎng)陰活血方組，Z）、西藥組（辛伐他汀組，X）、中藥+西藥組(益氣養(yǎng)陰活血方+辛伐他汀組，ZX)各11只。參考相關(guān)文獻(xiàn)，M、Z、X、ZX組大鼠給予濃度為1％的鏈脲佐菌素(STZ)檸檬酸緩沖液（檸檬酸緩沖液濃度為0.1mmol/L，pH4.5）按60mg/kg體重一次性腹腔注射，N組則給予相應(yīng)體積的1％檸檬酸-檸檬酸鈉溶液腹腔注射。72h后大鼠尾靜脈采血測(cè)血糖，若大鼠血糖超過(guò)16.7mmol/L，飲水量及尿量均顯著增多，則造模成功。Z

3、組給予益氣養(yǎng)陰活血方按3.17ml/kg體重水煎濃縮液灌胃，X組給予辛伐他汀片濃縮液0.33mg/kg灌胃，ZX組上午給予與中藥組等量益氣養(yǎng)陰活血中藥，下午給予與西藥組等量辛伐他汀灌胃，N組與M組給予相應(yīng)中藥體積的生理鹽水灌胃，每日一次，共灌胃12周。于末次灌胃后禁食、禁水12h，2％戊巴比妥鈉按20mg/kg體重腹腔注射麻醉，斷頭取血，檢測(cè)血漿葡萄糖、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇及高密度脂蛋白膽固醇。無(wú)菌操作取胸主動(dòng)脈1-2cm作為標(biāo)

4、本，置于4％的多聚甲醛溶液中固定，制作切片行HE染色，觀察血管內(nèi)皮組織變化情況，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清內(nèi)皮脂肪酶(EL)的水平。
　　結(jié)果:
　　1.各組大鼠的一般情況在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，N組大鼠精神飽滿，活動(dòng)自如，飲食、飲水、尿量均正常。M組大鼠則出現(xiàn)精神萎靡，明顯多飲、多食、多尿，體重逐漸減輕，毛色枯黃，反應(yīng)遲鈍等表現(xiàn)，符合糖尿病臨床“三多一少”的特征。各治療組大鼠表現(xiàn)介于正常組與模型組之間。偶有大鼠出現(xiàn)肢體活動(dòng)不利、皮膚潰爛

5、等表現(xiàn)。M組、ZX組各死亡2只，Z組死亡1只。
　　2.各組大鼠血糖水平的觀察M組及各治療組大鼠血糖均增高，與正常組相比，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;X組與M組之間比較血糖變化不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);Z及ZX組與M組之間比較血糖降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Z組與ZX組之間比較血糖變化不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3.各組大鼠總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL)、低密度脂

6、蛋白膽固醇(LDL)水平的觀察M組及各治療組大鼠TC均增高，與正常組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Z組與M組之間比較TC變化不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;X組及ZX組與M組之間比較TC降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);X組與ZX組之間比較TC變化不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　M組及各治療組大鼠LDL均增高，與正常組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Z組與M組之間比較LDL變化不明顯，無(wú)統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);X組及ZX組與M組之間比較LDL降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);ZX組與X組比較，LDL降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　M組及各治療組與正常組大鼠之間比較，HDL明顯降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);各治療組與M組之間比較HDL明顯增高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);三個(gè)治療組之間兩兩比較，HDL有明顯變化，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.各組大鼠胸主動(dòng)脈

8、內(nèi)皮組織形態(tài)的觀察HE染色后N組內(nèi)皮細(xì)胞紋理清晰，走形正常，細(xì)胞漿著色均勻，胸主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞扁平，內(nèi)膜光滑、平坦，中膜是平行相間排列的平滑肌細(xì)胞(smooth muscle cell，SMC)和彈力板。M組大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)膜呈局限性增厚且局部隆起，近內(nèi)膜的中膜平滑肌細(xì)胞可見(jiàn)增生及排列紊亂，增生平滑肌細(xì)胞處的彈力板排列不規(guī)則，呈波浪狀，偶可見(jiàn)彈力板斷裂、分離現(xiàn)象。各治療組大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的組織形態(tài)變化較模型組明顯減輕。
　　5.各

9、組大鼠酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清內(nèi)皮脂肪酶(EL)表達(dá)的情況M組及各治療組大鼠EL均增高，與正常組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);各治療組與M組之間比較EL明顯降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);三個(gè)治療組之間兩兩比較，EL有變化明顯，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.益氣養(yǎng)陰活血方可使糖尿病大鼠的一般狀態(tài)好轉(zhuǎn)，降低血糖，調(diào)節(jié)脂代謝。
　　2.益氣養(yǎng)陰活血方可使糖尿病大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮組織的