2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、亞砷酸在體外及體內(nèi)均具有明顯的抗腫瘤活性。已證實的亞砷酸抗腫瘤機制包括:使線粒體跨膜電位下降,激活caspase,使細胞內(nèi)活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)升高,下調(diào)端粒酶活性,使胞質(zhì)Ca2+濃度升高,調(diào)節(jié)鈣離子敏感的關(guān)鍵酶如蛋白激酶、磷脂酶、核酸內(nèi)切酶及谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶等誘導(dǎo)凋亡,促使PML/RARa融合蛋白降解,還可減少BCR—ABL蛋白含量,降低其蛋白酪氨酸激酶活性。在不斷明確亞砷酸抗腫瘤機制的同

2、時也發(fā)現(xiàn)其用藥過程中存在一些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的多種激酶的負反饋激活。本研究從蛋白質(zhì)水平探討K562/DNR細胞中mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中各激酶磷酸化水平與亞砷酸反應(yīng)的關(guān)聯(lián)。觀察K562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸處理后細胞中pmTOR、pAKT、pP70S6K的表達;觀察K562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸聯(lián)合PI3K抑制劑Ly294002或mTOR抑制劑雷帕霉素處理后細胞的凋亡率。 方法: 1、應(yīng)用western blot方法檢測K562/

3、DNR細胞經(jīng)亞砷酸處理10分鐘、30分鐘、60分鐘、120分鐘后及未經(jīng)亞砷酸處理的細胞中pmTOR、pAKT、pP70S6K的表達。pmTOR、pAKT、pP70S6K及β—actin各條帶通過灰度分析定量,灰度比值通過ScionImaging軟件計算得到。 2、應(yīng)用流式細胞術(shù)采用Annexin V—FITC細胞凋亡檢測試劑盒檢測K562/DNR細胞經(jīng)PI3K抑制劑Ly294002及mTOR抑制劑雷帕霉素聯(lián)合亞砷酸處理120小時

4、后細胞的凋亡率。 結(jié)果: 1、K562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸處理60分鐘(0.843±0.006)及120分鐘時(1.030±0.017)pmTOR的表達高于未經(jīng)亞砷酸處理組(對照組)(0.477±0.015)(p<0.01),K562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸處理10分鐘(0.510±0.010)及30分鐘時(0.527±0.006)pmTOR的表達與對照組相比無顯著差別(p>0.01),K562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸處理30分

5、鐘(0.960±0.010)及60分鐘時(1.023±0.025)pAKT的表達高于對照組(0.443±0.012)(p<0.01),K562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸處理10分鐘(0.423±0.021)及120分鐘時(0.560±0.036)pAKT的表達與對照組相比無顯著差別(p>0.01),K562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸處理60分鐘時(1.017±0.015) pP70S6K的表達高于對照組(0.503±0.021)(p<0.01),K

6、562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸處理10分鐘(0.533±0.025)、30分鐘(0.760±0.030)及120分鐘時(0.613±0.047) pP70S6K的表達與對照組相比無顯著差別(p>0.01); 2、K562/DNR細胞經(jīng)亞砷酸聯(lián)合Ly294002(18.0±1.0)或雷帕霉素(8.4±0.7)處理120小時后細胞凋亡率高于未經(jīng)藥物處理組(對照組)(4.5±0.8)、亞砷酸處理組(3.1±1.1)、雷帕霉素處理組(3.5

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