物理和化學信號介導的大鼠滑膜細胞病理反應及其信號轉導通路.pdf

1、類風濕關節(jié)炎(RA)是一種以關節(jié)滑膜炎為主要特征的慢性全身性自身免疫性疾病,其發(fā)病機制尚未清楚闡明,至今尚無治療的特效藥物。因而,進一步深入研究RA發(fā)生、發(fā)展的病理機制,并尋找針對性的治療靶點和藥物,對于關節(jié)炎的治療有重要意義。臨床研究表明,一些組織細胞的物理、化學微環(huán)境在病變關節(jié)處表現(xiàn)異常,如溫度、關節(jié)液pH值、滲透壓和ATP含量等,這些異常在RA病理中的作用機制和意義鮮有報道。為此,我們構建了膠原誘導的大鼠關節(jié)炎模型,用提取和培養(yǎng)的

2、滑膜成纖維樣細胞為標本,研究了一些物理因素和化學物(細胞外溶液不同程度的酸化,ATP的異常升高,及辣椒素)介導的大鼠滑膜細胞的病理反應(細胞的增生、死亡和一些細胞因子及炎性小分子的產(chǎn)生和釋放)及其信號轉導通路。 得到的主要研究結果如下： (1)確定了大鼠滑膜成纖維細胞表達TRPV1 mRNA。發(fā)現(xiàn)辣椒素和溶液酸化至pH 5.5分別能介導大鼠滑膜細胞死亡(包括凋亡),二者之間有協(xié)同效應。其信號通路中包括活化TRPV1誘導胞

3、外鈣內流升高[Ca2+]i,和大量產(chǎn)生ROS導致線粒體膜電位去極化。 (2)發(fā)現(xiàn)溶液酸化至pH 6.5能介導大鼠滑膜細胞增強黏附分子ICAM-1的表達,信號通路中包括PLC活化依賴的胞內Ca2+釋放從而升高[Ca2+]i,和激活核因子NF-kB的核轉位。進一步發(fā)現(xiàn)溶液酸化至pH 6.5通過抑制辣椒素誘導的滑膜細胞胞外Ca2+內流和ROS的產(chǎn)生,抑制辣椒素介導的細胞死亡效應。 (3)ATP能介導大鼠滑膜細胞增加氮氧自由基(

4、-氧化氮和超氧陰離子)產(chǎn)物,信號通路中包括活化P2樣受體誘導胞外Ca2+內流和胞內Ca2+釋放從而升高[Ca2+]i;ATP能協(xié)同LPS或TNF-α增加滑膜細胞NO的釋放,這一作用也與P2樣受體的活化有關。 總結上述結果,我們的研究首次證明了:RA病理條件下關節(jié)腔滑液的酸化(pH 6.4～7.0)增強滑膜細胞炎性介質的表達和抗辣椒素誘導的細胞死亡,表明其對炎癥的發(fā)展有重要意義。但若溶液進一步酸化到pH<5.9以下時,則可通過活化

5、TRPV1通道介導滑膜細胞死亡,并與辣椒素的促細胞死亡效應有協(xié)同作用,提示TRPV1通道可作為一個RA治療的靶點。ATP可通過活化P2樣受體介導炎性信號小分子的釋放,顯示了其在RA病理中的作用。以上的研究結果為從新的視角認識一些物理、化學因素在RA病理過程中的作用及尋找新的治療途徑提供了一定依據(jù)。此外,我們還研究了大黃有效成分蘆薈大黃素抑制人白血病細胞系Jurkat T細胞增殖和誘導其凋亡的作用特征及機制。結果表明：蘆薈大黃素劑量依賴性