縫隙連接蛋白43在低切應(yīng)力誘導(dǎo)小鼠頸總動(dòng)脈重建中的作用及其機(jī)制.pdf

1、血管重建（remodeling)是指機(jī)體在生長(zhǎng)、發(fā)育、衰老和疾病過(guò)程中,血管為適應(yīng)體內(nèi)外環(huán)境的變化而發(fā)生的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的改變。在正常切應(yīng)力條件下，血管重建處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。而低切應(yīng)力誘導(dǎo)血管發(fā)生病理性重建，從而導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓和血管再狹窄等心血管疾病。在血管重建過(guò)程中，縫隙連接蛋白（connexin，Cx）起到重要的作用，它們介導(dǎo)同源和異源血管細(xì)胞間的通訊，與血管細(xì)胞的生長(zhǎng)、凋亡、遷移和炎癥反應(yīng)等關(guān)系密切。因此，研究低切應(yīng)

2、力條件下血管細(xì)胞的Cx表達(dá)和調(diào)控機(jī)制具有重要的理論和實(shí)際意義。
　　本文通過(guò)結(jié)扎頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈，構(gòu)建了FVB/NJ小鼠頸總動(dòng)脈低血流模型;以 HE染色的血管組織切片測(cè)量血管幾何形態(tài)學(xué)變化； Western blotting和Real-Time PCR分別檢測(cè)血管組織 Cx43和miR-206的表達(dá)變化。然后，用血小板源性生長(zhǎng)因子（PDGF-BB，25 ng/ml）刺激體外培養(yǎng)的大鼠 VSMCs，以模擬低切應(yīng)力刺激；Transw

3、ell技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞遷移的變化，同時(shí)檢測(cè) PDGF-BB對(duì)VSMCs的Cx43和miR-206表達(dá)的影響，進(jìn)而使用miR-206 siRNA對(duì)培養(yǎng)的VSMCs進(jìn)行 RNA干擾，以探討 miR-206是否調(diào)控 PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs的遷移和Cx43的表達(dá)。最后，用Cx43 siRNA對(duì)培養(yǎng)的VSMCs進(jìn)行 RNA干擾，以探討 Cx43在PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移中的作用。
　　結(jié)果顯示：①小鼠右頸總動(dòng)脈部分分支結(jié)扎導(dǎo)致

4、右頸總動(dòng)脈血流量降低約90％，平均切應(yīng)力降低約70%；低切應(yīng)力可以誘導(dǎo)小鼠頸總動(dòng)脈內(nèi)膜新生，血管壁厚/內(nèi)徑比和內(nèi)膜/中膜面積比均顯著增高，同時(shí)又上調(diào) Cx43的表達(dá)和下調(diào) miR-206的表達(dá)；②重組PDGF-BB可以顯著促進(jìn) VSMCs遷移，上調(diào) Cx43的表達(dá)并抑制miR-206的表達(dá)；③干擾 miR-206上調(diào) Cx43的表達(dá)，明顯增強(qiáng)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移；④干擾 Cx43明顯抑制了PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移