超排卵后子宮內(nèi)膜中縫隙連接蛋白43的表達及意義.pdf

1、目的：
　　 體外受精-胚胎移植(IVF-ET)作為治療不孕癥的一種比較成熟的技術(shù)在臨床上已經(jīng)被廣泛應(yīng)用，但實際臨床妊娠率僅卻比較低，僅為20％-30％左右。IVF-ET成功的兩個關(guān)鍵性的因素是具有優(yōu)質(zhì)的胚胎以及胚胎的成功著床，而子宮內(nèi)膜的容受性又是決定胚胎著床是否成功的重要因素。目前，獲得優(yōu)質(zhì)胚胎已經(jīng)相對比較容易，但影響子宮內(nèi)膜的容受性的因素以及調(diào)控機理也十分復(fù)雜，具體機制目前不是很清楚，與子宮內(nèi)膜的容受性有關(guān)的物質(zhì)很多。因此

2、探討子宮內(nèi)膜在應(yīng)用促排卵藥物以后容受性降低的機制并尋找有效地抵抗方法，將對改善子宮內(nèi)膜容受性提高體外受精-胚胎移植的臨床妊娠率具有極其重要的意義，本實驗通過觀察促排卵藥對小鼠子宮內(nèi)膜和胚胎著床發(fā)育的影響，比較超排卵前后子宮內(nèi)膜中縫隙連接蛋白43Connexin43(Cx43)的表達，探討縫隙連接蛋白43與子宮內(nèi)膜容受性降低之間的關(guān)系，為進一步提高體外受精-胚胎移植的臨床妊娠率提供實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 隨機把16

3、0只雌性昆明小鼠分為兩個大組（受孕組和非孕組各80只），每個大組又分4個小組（1個對照組和3個超排卵組），每組20只，3個超排卵組為克羅米酚(CC)組（Ⅰ組），單純促排卵組(Ⅱ組)以及GnRHa+單純促排卵組（Ⅲ組）。僅把生理鹽水給予對照組作對照，把促排卵藥分別給予將相應(yīng)的各超排卵組。分別將非孕組小鼠于用藥后的24h和48h處死，然后取出其子宮并做成石蠟切片，再把切片進行HE和免疫組化染色，把對照組和實驗組子宮內(nèi)膜厚度、腺體發(fā)育情況以及

4、縫隙連接蛋白43表達的強度和位置，通過圖像處理技術(shù)和鏈酶親和素-生物素復(fù)合物(SABC)免疫組化方法進行比較和分析。把受孕組進行同樣的分組和給藥，于非孕組處死取材的當天，讓受孕組小鼠受孕。受孕后的雌鼠分別于第7d、17d分批處死，來觀察受孕雌鼠受精卵的著床以及胚胎發(fā)育情況在各種實驗條件下的差異。
　　 結(jié)果：
　　 非孕組:
　　 (1)子宮內(nèi)膜厚度:3個超排卵組之間無顯著性差異(p＞0.05)，但3個超排卵組的

5、厚度要明顯薄于對照組(p＜0.05);
　　 (2)腺體發(fā)育情況:在3個超排卵組中，GnRHa+單純促排卵組略優(yōu)于單純促排卵組和克羅米酚(CC)組，但無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);
　　 (3)縫隙連接蛋白43的表達情況:①對照組在用藥后24h、48h明顯低于三個實驗組(p＜0.05);②在克羅米酚(CC)組明顯高于單純促排卵組和GnRHa+單純促排卵組(p＜0.05);單純促排卵組與GnRHa+單純促排卵組之間無顯著性

6、差異(p＞0.05）;③縫隙連接蛋白43在動情周期中的表達有時間上的顯著性差異(p＜0.05)。
　　 受孕組:
　　 (1)胚胎著床率:3個超排卵組明顯低于對照組(p＜0.05)，但3個超排卵組之間無顯著性差異(p＞0.05);
　　 (2)胚胎發(fā)育情況:對照組及各實驗組之間都有差異，但無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.對子宮內(nèi)膜的影響:GnRHa+單純促排卵組是三個實驗組