粒毛盤菌YM120多糖的結(jié)構(gòu)表征、磷酸化修飾及其活性研究.pdf

1、本文對(duì)粒毛盤菌YM120的發(fā)酵提取、分離純化、結(jié)構(gòu)特征、磷酸化修飾、抗氧化活性、預(yù)防胃潰瘍活性及抗腫瘤活性進(jìn)行了研究，主要結(jié)果如下：
　　粒毛盤菌YM120胞外多糖及胞外蛋白多糖均具有顯著的體外抗氧化活性，且具有劑量-效應(yīng)關(guān)系。胞外多糖對(duì)O2ˉ·和DPPH自由基的清除作用強(qiáng)于胞外蛋白多糖，而其還原力、對(duì)·OH和亞硝酸鹽的清除作用均略低于胞外蛋白多糖。
　　粒毛盤菌YM120胞外多糖（LEP）經(jīng)脫蛋白、脫色等初步純化后，采用C

2、elluloseDEAE-52柱和SepharoseCL-6B柱進(jìn)行分級(jí)分離得單一組分LEP-1a。高效凝膠滲透色譜檢測(cè)其為均一多糖，分子量為32,237Da；全水解、乙?；蠼?jīng)GC-MS分析，表明LEP-1a的單糖組分為葡萄糖；高碘酸氧化-Smith降解、紅外光譜、1HNMR譜及13CNMR譜等分析結(jié)果表明LEP-1a是一種具有β-D-構(gòu)型的吡喃型葡聚糖，主鏈和支鏈均由1→3鍵連接組成，支鏈以1→6鍵連接在主鏈葡萄糖的C6位。

3、　　LEP-1a灌胃小鼠2周后，以無水乙醇誘導(dǎo)建立急性胃潰瘍模型，結(jié)果表明，低、中、高劑量多糖組小鼠的胃潰瘍出血面積均不同程度低于模型小鼠胃潰瘍的出血面積，其中高劑量多糖使小鼠的胃潰瘍指數(shù)由46.3%降低到4.43%。各劑量多糖組小鼠的胃蛋白酶活性、胃液量及胃液總酸度均明顯低于模型對(duì)照組（且呈明顯的量效關(guān)系），同時(shí)，小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性明顯提高，丙二醛（MDA）含量明顯降低。結(jié)果表明LEP-1a對(duì)無水乙醇型胃潰瘍具有顯

4、著的預(yù)防作用。
　　LEP-1a經(jīng)磷酸化反應(yīng)進(jìn)行修飾得磷酸化多糖PLEP-1a，其磷酸根含量為6.39%。紅外、13CNMR及31PNMR結(jié)果顯示該多糖原有的基本結(jié)構(gòu)未發(fā)生變化，–H2PO3基團(tuán)連接在LEP-1a支鏈的C6上?？鼓[瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，劑量為100mg/kg和400mg/kg的LEP-1a均能顯著提高S180肉瘤小鼠的攝食量、體重、抑瘤率和胸腺指數(shù)，提高小鼠血清中SOD酶活、IL-2及TNF-α的水平，表明LEP-1a具