粒毛盤菌YM261多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)特征及其活性研究.pdf

1、本文對(duì)粒毛盤菌(Lachnum)YM261(LEPS)多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)特征及其活性進(jìn)行了研究,主要結(jié)果如下:
　　 在碳源、氮源、金屬離子、起始pH和發(fā)酵時(shí)間五個(gè)單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用正交試驗(yàn)法對(duì)Lachnum YM261胞外多糖發(fā)酵條件進(jìn)行研究。得出最優(yōu)發(fā)酵條件為:20％的馬鈴薯浸汁,葡萄糖22 g／L,酵母膏3 g／L、硫酸錳0.05 g／L。轉(zhuǎn)速150 r／min,pH5.0下培養(yǎng)10 d,該條件下YM261胞外多糖

2、產(chǎn)量可達(dá)2.77 g／L,相對(duì)于優(yōu)化前提高了38.96％,通過(guò)單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)得出粒毛盤菌YM261胞內(nèi)多糖熱水浸提的最優(yōu)提取條件為:溫度70℃,時(shí)間6 h,液料比80:1,多糖得率為7.92％。
　　 通過(guò)測(cè)定Lachnum YM261多糖的還原能力,清除自由基能力、抑菌活性、抗疲勞以及對(duì)D-gal致衰老小鼠的抗衰老作用研究其生物活性,結(jié)果表明:多糖的還原能力隨著濃度的增加呈增強(qiáng)趨勢(shì),且對(duì)羥自由基(·OH)、亞硝基(NO2

3、-)和超氧陰離子(O2-·)具有明顯的清除作用。YM261多糖對(duì)枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和釀酒酵母具有一定的抑制作用,均隨著多糖濃度的增加呈增強(qiáng)趨勢(shì)。在抗疲勞試驗(yàn)中,低、中、高劑量LEPS組小鼠力竭游泳時(shí)間、肌糖原、肝糖原含量以及乳酸脫氫酶活力比正常對(duì)照組均明顯增加,血尿素氮含量明顯減少,并且呈量效關(guān)系。其中高劑量多糖組小鼠乳酸脫氫酶活力較正常對(duì)照組增加了31.72％,血尿素氮含量減少了51.49％。表明LEPS具有較好的

4、抗疲勞作用。在抗衰老試驗(yàn)中,注射LEPS4周后,低、中、高劑量多糖可明顯提高小鼠肝臟指數(shù)和腦指數(shù)。低、中、高劑量多糖組小鼠肝、腦勻漿和血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)、過(guò)氧化氫酶(CAT)活性比D-gal模型對(duì)照組均明顯增加。而低、中、高劑量多糖組小鼠丙二醛(MDA)含量明顯減少,其中高劑量多糖組小鼠肝、腦勻漿和血清MDA含量較D-gal模型組分別降低了43.37％、50.79％和52.81％。結(jié)果表明

5、LEPS具有較強(qiáng)的抗衰老作用。
　　 LEPS-1經(jīng)高效凝膠滲透色譜檢測(cè)為均一多糖,分子量為21670Da,GC-MS分析結(jié)果表明LEPS-1的單糖組分為葡萄糖,高碘酸氧化和smith降解分析證明LEPS-1存在不可被氧化的1→3糖苷鍵。紅外光譜結(jié)果顯示LEPS-1具有典型β-D型糖苷鍵的特征吸收峰,1HNMR譜顯示LEPS-1為β-D-吡喃型糖苷鍵連接的多糖。這些結(jié)果表明LEPS-1的化學(xué)結(jié)構(gòu)是以β-(1→3)-D-吡喃型糖苷