PTH1-34與雌激素對去勢雌性大鼠牙槽骨影響的實驗研究.pdf

1、骨質(zhì)疏松癥（Osteoporosis，OP）是Pommer在1885年提出來的，它是一種以低骨量和骨組織微細(xì)結(jié)構(gòu)退變?yōu)樘卣鞯娜硇怨趋兰膊。子趯?dǎo)致骨脆性增加和骨折的發(fā)生[1]。近年來，隨著人口的老齡化加劇，骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率已經(jīng)躍居世界常見病多發(fā)病的前列。有統(tǒng)計顯示，我國60歲以上老年人骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率達(dá)56％。女性由于絕經(jīng)后雌激素水平降低、骨峰值較低和骨丟失率高等原因，發(fā)病率更是高達(dá)60-70％。OP嚴(yán)重影響了老年人特別是絕經(jīng)后女

2、性的身體健康，而且還給社會和家庭帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，成為不容忽視的一種全身代謝性疾病。有動物實驗和臨床研究表明[2.3]，OP對牙槽骨的骨礦含量和剩余牙槽骨體積都會產(chǎn)生明顯影響。這些影響是我們在臨床進(jìn)行相關(guān)口腔疾病治療（比如治療牙周病、設(shè)計制作活動義齒、種植義齒和正畸矯治中老年人牙頜畸形）的過程中所不能忽視的。目前臨床上對OP的治療，主要是通過抑制骨吸收和降低骨轉(zhuǎn)換率來提高骨密度，而對骨質(zhì)量的改善尚缺乏有效的治療方法。近年來的研究發(fā)現(xiàn)

3、小劑量、間歇應(yīng)用甲狀旁腺激素對骨形成有促進(jìn)作用，同時還可以改善骨骼的微結(jié)構(gòu)，為原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的治療開辟了更有效的新途徑。
　　 目的:
　　 通過去除雌性Wistar大鼠雙側(cè)卵巢組織建立骨質(zhì)疏松動物模型，觀察甲狀旁腺激素(PTH1-34)與雌激素對去勢后雌性大鼠牙槽骨的影響，從而為臨床上應(yīng)用甲狀旁腺激素(PTH1-34)治療與絕經(jīng)后女性骨質(zhì)疏松相關(guān)的口腔疾病提供實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 選用3～4

4、月齡健康Wistar雌性大鼠66只，隨機分成兩組，即偽手術(shù)組（SHAM組）18只和去勢組（OVX組）48只。OVX組完整去除大鼠雙側(cè)卵巢組織，SHAM組僅去除卵巢周圍與卵巢重量相當(dāng)?shù)闹窘M織。去勢手術(shù)8周后，測量兩組大鼠的體重和血清中鈣(Ca2+)、磷(P3+)、堿性磷酸酶(ALP)、雌激素(E2)、甲狀旁腺激素(PTH)的濃度。然后，每組隨機抽取8只大鼠，取大鼠右側(cè)上頜牙槽骨和近干骺端脛骨，使用雙能X線骨密度測量儀測量骨組織的密度，再

5、制作骨組織切片，進(jìn)行組織學(xué)觀察，鑒定骨質(zhì)疏松模型是否建立成功。模型建立成功后，將SHAM組剩余的10只大鼠編為A組，將OVX組剩余的40只大鼠隨機分成B、C、D、E四組，每組10只。對A組（偽手術(shù)組）和B組（去勢組）按照1ml/kg體重腹腔注射0.9％生理鹽水;對C組（去勢加雌激素治療組）大鼠按照10μg/kg體重腹腔注射苯甲酸雌二醇;D組（去勢加甲狀旁腺激素治療組）大鼠按照20μg/kg體重腹腔注射甲狀旁腺激素;E組（去勢加雌激素、甲

6、狀旁腺激素治療組）大鼠按照10μg/kg體重腹腔注射苯甲酸雌二醇和20μg/kg體重腹腔注射甲狀旁腺激素。各組大鼠隔日注射一次，連續(xù)用藥8周。用藥8周后，取大鼠右側(cè)上頜牙槽骨和近干骺端脛骨，使用雙能X線骨密度測量儀測量骨組織的密度。然后立即放入4％甲醛溶液中固定，4℃條件下10％甲酸溶液中脫鈣，制作骨組織切片，進(jìn)行HE染色。利用計算機病理圖像采集與分析系統(tǒng)和骨組織計量學(xué)軟件，對各組大鼠骨組織的形態(tài)計量學(xué)參數(shù)進(jìn)行對比;同時測定用藥8周后各

7、組大鼠血清中鈣(Ca2+)、磷(P3+)、堿性磷酸酶(ALP)、雌激素(E2)、甲狀旁腺激素(PTH)的水平。應(yīng)用SPSS13.0軟件包對各組實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理。
　　 結(jié)果:
　　 1、大鼠去勢手術(shù)進(jìn)展順利。術(shù)后8周，OVX組大鼠體重較SHAM組顯著增加，兩者相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);OVX組大鼠與SHAM組大鼠相比，血清Ca2+濃度、E2濃度降低、血清P3+濃度、ALP活性、血清PTH濃度升高，差

8、異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。通過雙能X線骨密度測量儀檢測發(fā)現(xiàn)OVX組大鼠脛骨和牙槽骨的骨密度和SHAM組大鼠相比均顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。兩組大鼠在骨組織形態(tài)計量學(xué)上比較，OVX組大鼠脛骨和上頜牙槽骨的骨小梁面積百分?jǐn)?shù)降低，平均骨小梁寬度降低，平均骨小梁數(shù)目減少，平均骨小梁間距增大，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，說明成功建立實驗動物的骨質(zhì)疏松模型。
　　 2、各實驗組大鼠在用藥8周后，C組和B組比

9、較，血清P3+、血清ALP、血清PTH濃度明顯降低，血清Ca2+、血清E2濃度升高(P＜0.05）;通過雙能X線骨密度測量儀檢測，脛骨及上頜骨的骨密度增加(P＜0.05);骨組織形態(tài)計量學(xué)上，脛骨和上頜骨的％Tb.Ar、Tb.Th、Tb.N均增加(P＜0.05），Tb.Sp均減少(P＜0.05）。D組和B組比較，血清P3+、血清PTH濃度明顯降低，血清Ca2+、血清ALP升高(P＜0.05)。通過雙能X線骨密度測量儀檢測，脛骨及上頜骨的

10、骨密度增加(P＜0.05）;骨組織形態(tài)計量學(xué)上，脛骨和上頜骨的％Tb.Ar、Tb.Th、Tb.N均增加（P＜0.05），Tb.Sp減少(P＜0.05)。E組和B組比較，血清P3+、血清ALP、血清PTH濃度明顯降低，血清Ca2+、血清E2濃度升高（P＜0.05）。通過雙能X線骨密度測量儀檢測，脛骨及上頜骨的骨密度增加（P＜0.05）;骨組織形態(tài)計量學(xué)上，脛骨和上頜骨的％Tb.Ar、Tb.Th、Tb.N均增加(P＜0.05），Tb.Sp減

11、少(P＜0.05);與A組比較Tb.Ar、Tb.Th、Tb.N和Tb.Sp差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。D組和C組比較，血清P3+濃度、血清E2濃度降低，血清ALP活性、血清PTH濃度升高（P＜0.05）;通過雙能X線骨密度測量儀檢測，脛骨和上頜骨密度增加，但是差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05）;骨組織形態(tài)計量學(xué)上，脛骨和上頜骨的％Tb.Ar、Tb.Th、Tb.N和Tb.Sp差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05）。E組和C組比較，血清P3+

12、濃度、血清ALP活性明顯降低(P＜0.05）;通過雙能X線骨密度測量儀檢測，脛骨骨密度增加（P＜0.05），上頜骨骨密度增加，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05）;骨組織形態(tài)計量學(xué)上，脛骨％Tb.Ar、Tb.Th增加（P＜0.05），Tb.Sp減少(P＜0.05)，Tb.N增加不明顯(P＞0.05);上頜骨％Tb.Ar、Tb.Th、Tb.N增加(P＜0.05），Tb.Sp減少(P＜0.05)。E組和D組比較，血清ALP、血清PTH濃度明顯

13、降低，血清E2濃度升高(P＜0.05)。通過雙能X線骨密度測量儀檢測，脛骨、上頜骨骨密度增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);骨組織形態(tài)計量學(xué)上，脛骨％Tb.Ar、Tb.Th增加(P＜0.05)，Tb.Sp減少(P＜0.05），Tb.N增加不明顯(P＞0.05）;上頜骨％Tb.Ar、Tb.Th、Tb.N增加(P＜0.05)，Tb.Sp減少(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、去除雌性大鼠雙側(cè)卵巢組織8周后，出現(xiàn)