卵巢上皮性癌血漿游離DNA的檢測及臨床價值.pdf

1、目的:通過對健康對照、卵巢良性腫瘤及卵巢上皮性癌患者血漿中游離DNA水平的檢測,以期建立一種能夠?qū)υ缙诼殉舶┻M行快捷、敏感、特異的篩查診斷方法;通過觀察卵巢上皮性癌循環(huán)DNA不同時期的動態(tài)變化,進一步了解血漿游離DNA在療效觀察、復發(fā)預測及預后隨訪中的作用;同時還進行血漿游離DNA水平與血清CA125水平的相關性研究,以期找出血漿游離DNA的變化規(guī)律及與血清CA125的相關性,進一步完善卵巢癌的診斷及隨訪指標.方法:收集復旦大學附屬腫瘤

2、醫(yī)院卵巢上皮性癌標本207份,其中術前血標本93份,術后血標本114份,有完整隨訪資料標本12份.另外收集卵巢良性腫瘤標本25份,取自腫瘤研究所健康體檢人群標本30份.所收集標本離心去血球后-80C°凍存;采用DNA抽提試劑盒進行劑量DNA抽提和純化;利用標準含量DNA制訂檢測DNA的標準曲線;應用SYBR green I作為熒光顯色劑,在紫外與可見光成像分析系統(tǒng)內(nèi),345nm波長紫外光下激活,以CCD相機攝像后輸入電腦系統(tǒng),分別讀取各

3、不同含量DNA所顯色的發(fā)光強度,再根據(jù)標準曲線所作回歸方程,分別計算出其相應的DNA含量.采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析.結論:卵巢癌血漿游離DNA的檢測,跨越了檢測腫瘤切除標本的局限性,有望成為一種方便、快捷、特異、無創(chuàng)或微創(chuàng)性的檢測手段.即使在Ⅰ期患者中,血漿DNA水平也顯著升高,因此有望成為卵巢癌早期診斷的一個理想指標.并可在卵巢癌的療效觀察、復發(fā)預測及預后隨訪等方面發(fā)揮作用;術后血漿DNA持續(xù)維持較高水平,可能提示預