山核桃嫁接愈合過程的解剖學研究及IAA免疫金定位.pdf

1、山核桃(Carya carthayensis Sarg.)是我國特有的優(yōu)質(zhì)干果和木本油料樹種,具有很高的經(jīng)濟價值,但在自然條件下童期長,始果期遲,良種化程度不高,而嫁接能有效縮短童期、提早結實,改良品種,擴大適種范圍,然長期以來本砧嫁接技術難度大,成活較困難。 本文利用光學顯微鏡和透射電子顯微鏡,結合免疫膠體會標記技術,研究了山核桃本砧嫁接愈合過程中砧穗接合部的解剖結構以及IAA在細胞中的分布。旨在豐富和完善山核桃本砧嫁接技術及

2、其理論依據(jù),揭示山核桃嫁接過程中內(nèi)源IAA在細胞中的分布及變化,探討IAA在山核桃嫁接愈合過程中發(fā)揮作用的機制,為IAA調(diào)控山核桃嫁接愈合過程的深入研究奠定基礎。主要研究結論如下： 1、山核桃本砧嫁接愈合過程大致分為4個階段：隔離層的形成、增厚及砧穗初始粘連(1-6 d);愈傷組織的生長與隔離層的解體、消失(7-12 d);砧穗間維管束橋的形成與貫通(14-23 d),維管組織的分化與連接(24-40 d)。嫁接后愈合組織區(qū)域最

3、先發(fā)生的變化是隔離層的消長。砧、穗形成層區(qū)域最先形成隔離層,嫁接后第1-3 d形成隔離層,第3-6 d逐漸加厚；此后隔離層兩側愈傷組織細胞進行活躍分裂活動,隔離層細胞內(nèi)物質(zhì)逐漸被吸收,愈傷組織細胞分裂后突破隔離層,至嫁接后第12 d隔離層完全解體消失,已有篩分子分化；至嫁接后第14 d開始,隨著管狀分子的分化,維管束橋逐漸分化并貫通,40 d左右愈合過程基本結束,砧穗連為一體,信息傳遞和物質(zhì)交換順利進行。隔離層開始形成到完全消失的過程中

4、,隔離層兩側愈傷組織細胞進行旺盛的生理代謝活動,切口外側細胞的胞間連絲迅速關閉,而內(nèi)側細胞的胞間連絲物質(zhì)交換活躍；近隔離層的細胞之間部分細胞壁降解,細胞間的原生質(zhì)體穿壁融合：高爾基體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器數(shù)量顯著增加,多泡體、壁旁體等膜狀結構頻繁出現(xiàn),淀粉粒先積累后逐漸消失。 2、利用免疫膠體金標記技術和電鏡技術研究了山核桃嫁接愈合過程中游離IAA在細胞中的免疫金定位,表明：山核桃嫁接面愈傷組織細胞IAA的免疫反應特異性強,金