中國(guó)甜柿‘鄂柿1號(hào)’自然和40℃溫水脫澀前后差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析.pdf

1、‘鄂柿1號(hào)’是在湖北省大別山區(qū)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)中國(guó)原產(chǎn)完全甜柿(“中國(guó)甜柿”或C-PCNA)新種質(zhì)。該品種果實(shí)大，種子少，栽培價(jià)值高于‘羅田甜柿’，但其自然脫澀特點(diǎn)和機(jī)理研究鮮有報(bào)道。本研究以中國(guó)甜柿‘鄂柿1號(hào)’為主要試材，以中國(guó)甜柿‘羅田甜柿’、日本甜柿(“日本原產(chǎn)完全甜柿”或J-PCNA)‘陽(yáng)豐’和非完全甜柿‘磨盤(pán)柿’為對(duì)照，通過(guò)檢測(cè)自然及40℃溫水脫澀處理前后果實(shí)可溶性單寧含量變化，同時(shí)利用iTRAQ技術(shù)分析其蛋白組學(xué)差異，以期探討中國(guó)

2、甜柿‘鄂柿1號(hào)’自然脫澀特點(diǎn)及其可能的分子機(jī)理。主要研究結(jié)果如下:
　　1.四個(gè)柿品種不同時(shí)期單寧變化各不相同，‘羅田甜柿’、‘鄂柿1號(hào)’自然脫澀主要集中在20 WAF至25 WAF，遠(yuǎn)遠(yuǎn)晚于‘陽(yáng)豐’(10 WAF)?！_田甜柿’、‘鄂柿1號(hào)’在10 WAF至15 WAF期間不溶性單寧含量相對(duì)前期迅速上升，且此時(shí)可溶性單寧含量下降，進(jìn)一步驗(yàn)證‘鄂柿1號(hào)’自然脫澀既有“稀釋效應(yīng)”又存在“凝固效應(yīng)”。
　　2.‘鄂柿1號(hào)’果實(shí)不

3、同處理?xiàng)l件下可溶性單寧含量變化不同，40℃溫水處理使柿果在處理12h后基本完成脫澀。且不可溶性單寧含量升高與可溶性單寧含量直線下降時(shí)期相對(duì)應(yīng)。因此，初步推測(cè)‘鄂柿1號(hào)’40℃溫水處理過(guò)程中亦存在“凝固效應(yīng)”。
　　3.通過(guò)iTRAQ技術(shù)共鑒定到4954個(gè)蛋白質(zhì)類(lèi)別數(shù)(protein group)，2段以上不同肽段（uniquepeptide）覆蓋的蛋白3041個(gè)，占全部蛋白的61.37％。其蛋白質(zhì)分子量10-70 kDa;等電點(diǎn)4

4、.7-7.4和7.9-9.5。以(F10)為內(nèi)參，差異倍數(shù)為1.2為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所鑒定4954個(gè)蛋白質(zhì)進(jìn)行篩選，獲得約500個(gè)差異蛋白。
　　4.生物信息學(xué)分析結(jié)果表明在‘鄂柿1號(hào)’自然脫澀與人工脫澀過(guò)程中均涉及一些與能量代謝相關(guān)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上蛋白質(zhì)加工的代謝途徑、與果實(shí)成熟、響應(yīng)刺激相關(guān)等代謝途徑。自然脫澀情況下主要涉及類(lèi)黃酮合成，苯丙烷合成途徑的下調(diào)表達(dá)，ABC轉(zhuǎn)運(yùn)模型，木質(zhì)素代謝途徑上調(diào)表達(dá);而人工脫澀情況下主要是各種應(yīng)