地塞米松聯(lián)合透明質(zhì)酸鼓室灌注豚鼠內(nèi)耳藥動學(xué)研究.pdf

1、一．背景與目的 自1980年Willson等首先采用隨機(jī)及對照研究方法，證實了口服類固醇激素治療突發(fā)性聾的肯定效果后，美國及其他一些國家(包括中國)將口服類固醇激素作為突發(fā)性聾的一線治療藥物。然而，全身大量應(yīng)用激素存在一定的副作用，并且一些突發(fā)性聾患者由于合并有高血壓及糖尿病而不能全身應(yīng)用激素治療，而且在經(jīng)過全身系統(tǒng)激素治療的患者中，仍有相當(dāng)數(shù)量的患者癥狀不能改善。于是一個新的治療途徑受到關(guān)注一類固醇激素鼓室內(nèi)灌注的局部應(yīng)用。與

2、全身用藥相比，局部用藥的主要優(yōu)點有：1．目的性強(qiáng)，藥物-靶定位性好；2．可避開血-迷路屏障，直接進(jìn)入內(nèi)耳；3．淋巴液中藥物濃度高；4．無全身不良反應(yīng)。并且，一些臨床研究表明，經(jīng)過全身系統(tǒng)應(yīng)用激素治療無效的患者，通過局部激素灌注治療，仍有部分患者聽力得到改善，但有關(guān)局部給藥的許多具體問題尚不完全明確，如類固醇激素種類的選擇、局部給藥的策略——鼓室內(nèi)注射抑或微泵給藥、藥物劑量、輔助劑的應(yīng)用、給藥時間等需要進(jìn)一步研究和積累數(shù)據(jù)。 透明

3、質(zhì)酸是一種大分子黏多糖，常用于中耳手術(shù)后預(yù)防粘連的形成。動物實驗證明，透明質(zhì)酸對內(nèi)耳的結(jié)構(gòu)和功能無明顯影響。另有研究表明，透明質(zhì)酸可延長小分子物質(zhì)與圓窗膜的接觸時間并增加其通透性。為提高外淋巴液中激素水平并維持較長的作用時間，我們采用透明質(zhì)酸作為輔助劑，觀察激素在外淋巴液中的藥動學(xué)特點，并與明膠海綿的作用進(jìn)行比較。本實驗的目的：1.研究經(jīng)鼓室途徑給予地塞米松后，豚鼠鼓階外淋巴、血液、腦脊液中地塞米松的藥物代謝動力學(xué)特征，并與全身用藥進(jìn)行

4、比較。2.比較地塞米松-透明質(zhì)酸鼓室注射與鼓室注射地塞米松及地塞米松-明膠海綿鼓室內(nèi)填充后，豚鼠外淋巴的地塞米松水平和維持時間。 二.材料和方法將60只鼓膜和普賴爾反射正常，體重500-600g的白化豚鼠隨機(jī)分為對照組、口服組、靜脈組、鼓室灌注地塞米松組(intratympanic-iniection dexamethasone，ITI-DEX)、鼓室灌注地塞米松-透明質(zhì)酸組(intratympanic-injectiondex

5、amethasone/hyaluronic acid，ITI-DEX/HA)及鼓室內(nèi)地塞米松-明膠海綿填充組(intratympanic-fiUed dexamethasone，ITF-DEX)，各組均10鼠20耳。分別對口服組和靜脈組進(jìn)行地塞米松(8mg/ml)罐胃和心內(nèi)注射，劑量為8mg/kg；對照組，鼓室灌注地塞米松組及鼓室灌注地塞米松-透明質(zhì)酸組分別行鼓室灌注生理鹽水、地塞米松(8mg/ml)及地塞米松(8mg/ml)/透明質(zhì)酸

6、(2mg/ml)；鼓室內(nèi)地塞米松明膠海綿填充組將地塞米松(8mg/ml)浸泡的明膠海綿顆粒填滿鼓室。各組均在給藥后0.5-、1-、2-、4-和6-h分別對外淋巴、腦脊液和血液進(jìn)行取樣，各組每個取樣時間點均有2鼠4耳。取樣順序：血液、外淋巴、血液。高效液相色譜分析(HPLC)檢測：精密配制0.1-、0.5-、5-、25-、50-(mg/L)標(biāo)準(zhǔn)液，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行精密度及穩(wěn)定性實驗后，所有樣品逐一上機(jī)檢測，由EmpowerPDA Sof

7、tware數(shù)據(jù)處理軟件處理，計算樣品地塞米松濃度。統(tǒng)計學(xué)分析：各取樣時間點地塞米松平均濃度均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示，采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。對各組外淋巴液、腦脊液、血液樣品的地塞米松濃度分別進(jìn)行組件進(jìn)行單因素方差分析，P<0.05時認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義，即組問存在顯著性差異。 三.結(jié)果 1.各組外淋巴DEX濃度統(tǒng)計學(xué)比較1.1各組外淋巴DEX峰濃度比較： ①靜脈組(0.251±0.

8、018mg/L)顯著低于ITI-DEX組(1.803±0.155mg/L)、ITF-DEX組(2.016±0.137mg/L)及ITI-DEX/HA組(2.601±0.067mg/L)(P<0.05)； ②ITI-DEX/HA組高于ITI-DEX及ITF-DEX組，但僅對ITI-DEX組有顯著性意義(P<0.05)。 1.2各組外淋巴DEX終末濃度比較： ①靜脈組和ITI-DEX組均接近零濃度，而ITI-DEX/

9、HA組仍保持較高濃度(1.010±0.188mg/L)； ②ITI-DEX組濃度顯著低于ITI-DEX/HA組及ITF-DEX組(P<0.05)，但I(xiàn)TI-DEX/HA組與ITF-DEX組無顯著性意義(P>0.05)。 1.3各組外淋巴DEX平均濃度比較： ①靜脈組(0.131±0.080mg/L)顯著低于IT各組(P<0.05)； ②ITI-DEX/HA組平均濃度(1.572±0.621mg/L)高于I

10、TI-DEX組及ITF-DEX組，尤其對ITI-DEX組有顯著性意義(P<0.05)。 2.各組血液和腦脊液DEX藥動學(xué)分析對照組和IT各組的血液和腦脊液內(nèi)檢測不到DEX。而在口服組的血樣及靜脈組的血樣和腦脊液內(nèi)檢測到不同濃度的DEX，尤以靜脈組血樣中DEX平均濃度最高，顯著高于其他各組(P<0.05)。 四.結(jié)論 1.與全身給藥相比，鼓室灌注地塞米松可顯著增加外淋巴藥物濃度且不會被全身系統(tǒng)吸收，但維持時間較短，