重組水蛭素對大鼠皮膚撕脫傷中CD11b、CD18及ICAM-1動態(tài)表達影響的研究.pdf

1、目的:通過局部運用重組水蛭素對大鼠皮膚撕脫傷中粘附因子CD11b/CD18及ICAM-1動態(tài)表達的研究,探討重組水蛭素對皮膚撕脫的保護與該三項指標之間是否有密切關(guān)系,以及局部注射水蛭素后對大鼠撕脫皮瓣成活率的影響變化及作用機理。
　　方法:實驗共運用SD雄性大鼠132只,其中實驗大鼠隨機分為空白對照組60只、水蛭素局部注射運用組60只以及觀察組12只,并且空白對照組及水蛭素局部注射實驗組每時段留取4只作為皮瓣觀察存活情況。通過運用

2、王忠堂、郭樹忠等于2008年研究的動物模型制作成果,經(jīng)證實運用大鼠制作皮膚撕脫模型是完全可行的,按照其設(shè)計要求并行預(yù)試驗成功后,我們在大鼠設(shè)計為蒂在側(cè)腹部的任意皮瓣(6cm×4cm),并給予8kg持續(xù)8秒的牽拉,遠端蒂部予以保護,固定后與精密儀器相連接,皮瓣撕脫后遠端稍作處理后原位縫合,能夠達到相同實驗效果,證實為撕脫皮瓣后進行研究實驗,實驗組撕脫后皮瓣分十點進行局部注射水蛭素40IU(1ml),空白對照組撕脫后皮瓣同樣分十點進行局部注

3、射等量生理鹽水(1ml),正常觀察組不做任何處理,直接抽取外周血液及切取皮膚進行檢測;實驗組及對照組分別于0h、2h、4h、5h、6h、12h抽取大鼠外周血運用流式檢測技術(shù),檢測CD11b/CD18在其中中性粒細胞胞漿顆粒內(nèi)的陽性表達率,并切取皮瓣遠端組織通過免疫組織化學染色診斷檢測血管內(nèi)皮細胞膜表面ICAM-1的表達,同時進行定量分析,綜合了解分析三者的動態(tài)變化,留取的大鼠進行皮瓣愈合情況觀察并計算撕脫皮瓣成活率。
　　結(jié)果:通

4、過對術(shù)后每時段實驗組及空白對照組肉眼觀察及指標檢測對比,發(fā)現(xiàn)術(shù)后兩組皮瓣均出現(xiàn)充血水腫現(xiàn)象,對照組大鼠術(shù)后三天后遠端皮瓣不同程度的出現(xiàn)淤紫現(xiàn)象,術(shù)后第六天即遠端皮瓣出現(xiàn)不同程度壞死,呈現(xiàn)大小不等面積的黑色痂殼,與周圍成活組織分界清楚;經(jīng)剝離黑色痂殼后發(fā)現(xiàn)創(chuàng)面內(nèi)部有血性滲出及白色分泌物,內(nèi)面有肉芽組織生長;同時實驗組術(shù)后三天皮瓣充血腫脹減輕,皮瓣邊緣無紅腫及滲出物,實驗組大鼠在術(shù)后六天發(fā)現(xiàn)遠端撕脫皮瓣存活度仍尚好,邊緣無滲出,愈合度好,同

5、時實驗組和對照組皮瓣成活面積率分別為90.74±1.52％、75.38±2.64％(p<0.01)有顯著差異;大鼠皮膚撕脫后血液中粘附因子CD11b/CD18的陽性表達率隨時間推移逐步上升,12h達到高峰;通過定量統(tǒng)計發(fā)現(xiàn):在0h時段實驗組和對照組陽性表達率分別為24.13±2.36和24.75±3.06(p>0.05)沒有統(tǒng)計學意義,第2h時段實驗組和對照組陽性表達率分別為29.08±1.06和36.35±5.28(p<0.05)有統(tǒng)

6、計學意義;隨著時間段的推移,其4h、5h、6h、12h時段的陽性表達率逐步上升,分別為35.07±2.02和40.08±1.30、39.65±1.31和44.87±5.57、45.52±3.39和52.48±5.85、52.53±3.16和71.32±3.57(p<0.01)有顯著意義;雖然隨著時間的推移水蛭素局部運用組及空白對照組 CD11b/CD18陽性表達都在上升,但是,局部運用水蛭素后粘附因子陽性表達率明顯低于空白對照組(p<0

7、.05);同時發(fā)現(xiàn)在撕脫即刻(0h組)空白對照組和實驗組便能檢測出ICAM-1,其陽性表達分別5.31±2.12和5.25±1.87(p>0.05)無統(tǒng)計學意義,隨著時間段推移ICAM-1陽性表達率逐漸呈上升趨勢,在2小時、4小時、5小時、6小時及12小時時段結(jié)果分別為8.34±1.57和5.83±3.21、12.35±2.36和7.96±3.57、17.87±2.47和10.03±2.75、21.16±3.06和12.37±2.84、

8、25.35±3.56和17.36±2.32;其中空白對照組陽性表達率明顯高于水蛭素局部運用組(p<0.01);最終表明大鼠皮膚撕脫傷后局部運用水蛭素相對于空白對照組,皮膚撕脫后粘附因子CD11b/CD18及ICAM-1的陽性表達率有明顯的下降,水蛭素對該三項指標具有明顯的干擾作用,甚至是降低作用;同時經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)運用水蛭素組皮瓣的愈合成功率較空白對照組也有著明顯的提升。
　　結(jié)論:局部運用重組水蛭素對大鼠皮膚撕脫傷具有有效減低血液中