抗CD14單克隆抗體對膿毒癥大鼠肺組織KC和ICAM-1表達的影響.pdf

1、目的:
　　探討抗CD14單克隆抗體（Anti-CD14 monoclonal antibody，Anti-CD14McAb）治療大鼠膿毒癥急性肺損傷的保護機制。
　　方法:
　　在體部分：18只雄性Wistar大鼠（200g-250g）隨機均分為3組，膿毒癥組（CLP組）、假手術組（Sham組）、抗CD14治療組（Anti-CD14組）。CLP組和Anti-CD14組，采用盲腸結扎穿孔術建立膿毒癥急性肺損傷模型，Sh

2、am組作為對照組，開腹后只翻動盲腸，不進行結扎穿孔。Anti-CD14組術后經(jīng)股靜脈注射Anti-CD14McAb0.2ml（1ug/ml），Sham組、CLP組術后經(jīng)股靜脈注射等量生理鹽水0.2ml，6小時后經(jīng)腹主動脈抽血，測定3組大鼠血漿中KC、sICAM-1表達水平，右肺下葉HE染色，觀察肺組織病理結構的改變。離體部分：將培養(yǎng)的NR8383一部分接種于24孔培養(yǎng)板，分為3組，對照組（Ⅰ組）、膿毒癥模型組（Ⅱ組）和Anti-CD14

3、干預組（Ⅲ組）。Ⅰ組加入正常血漿，Ⅱ組加入膿毒癥血漿，Ⅲ組加入膿毒癥血漿和抗CD14單克隆抗體共同干預，37℃、5％CO2培養(yǎng)箱孵育1小時，刮取NR8383，采用Western blot測定NR8383內NF-κB（p65）蛋白的表達水平；另一部分接種在預先放入適當大小滅菌消毒的蓋玻片的24孔板上，分組及干預措施同上，采用激光掃描共聚焦顯微鏡（CLSM）檢測NR8383內NF-κB（p65）蛋白入核情況。
　　結果:
　　在

4、體實驗提示：與Sham組[KC（pg/ml）：72.645±19.860，sICAM-1（pg/ml）：252.766±19.921]相比，CLP組血漿KC、sICAM-1水平[KC（pg/ml）：490.316±43.403，sICAM-1（pg/ml）：686.952±36.411]和Anti-CD14組血漿KC、sICAM-1水平[KC（pg/ml）：348.150±20.924，sICAM-1（pg/ml）：411.050±47

5、.170]明顯升高，而Anti-CD14組KC、sICAM-1水平明顯低于CLP組，認為有統(tǒng)計學差異（P<0.05）；肺組織病理結果提示CLP組肺間質明顯增厚、肺間質及肺泡腔內有大量炎癥細胞浸潤，Anti-CD14組癥狀較CLP組明顯減輕，但較Sham組有所增加；細胞實驗Western blot檢測顯示：Ⅱ組（2.1903±0.1199）和Ⅲ組（1.3658±0.1018）NR8383的NF-κB（p65）入核量高于Ⅰ組（1.0122±

6、0.0780），Ⅲ組的NF-κB（p65）入核量低于Ⅱ組，差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。細胞實驗CLSM檢測結果提示：與Ⅰ組（0.131±0.009）相比，Ⅱ組（0.685±0.037）和Ⅲ組（0.210±0.008）NR8383NF-κB p65蛋白入核明顯升高，而Ⅲ組NR8383NF-κB p65蛋白入核低于Ⅱ組（0.685±0.037），差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論:
　　Anti-CD14McAb