創(chuàng)傷弧菌膿毒癥大鼠肺組織CD14、NF-κB和IL-18的基因表達(dá)及抗菌藥物的干預(yù)效應(yīng).pdf

1、目的：探討創(chuàng)傷弧菌膿毒癥大鼠肺組織內(nèi)毒素受體CD14、NF-kB和IL-18的基因表達(dá)以及頭孢哌酮鈉和乳酸左旋氧氟沙星聯(lián)合抗炎治療對其的干預(yù)效應(yīng)。 方法： 1.清潔級雄性SD大鼠110只，隨機(jī)分為11組，每組10只。第1組：正常對照組(NC組)；第2～6組：創(chuàng)傷弧菌膿毒癥組(VV組)，予雙下肢皮下注射創(chuàng)傷弧菌(濃度為9×108cfu/ml，劑量為1ml/100g)，制作創(chuàng)傷弧菌膿毒癥模型，并分別于注射創(chuàng)傷弧菌后2h、6h

2、、9h、12h、16h時活殺；第7～11組：創(chuàng)傷弧菌膿毒癥聯(lián)合抗炎治療干預(yù)組(AA組)，予雙下肢皮下注射創(chuàng)傷弧菌(濃度、劑量同VV組)，從注射創(chuàng)傷弧菌后6h起，予腹腔注射(ip)頭孢哌酮鈉(180mg/kg)和乳酸左氧氟沙星(18mg/kg)，每日2次，分別在注射創(chuàng)傷弧菌后9h、12h、16h、36h、2w時活殺。無菌取部分肺組織保存于液氮中待用。 2.采用Trizol試劑提取各組大鼠肺組織總RNA，紫外分光光度計測定RNA濃度

3、，以總RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA；然后以cDNA為模板，以大鼠CD14、NF-kB、IL-18引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)；擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，電泳結(jié)果用凝膠成像系統(tǒng)成像，QuanityOne分析軟件進(jìn)行分析，以(目的基因/β-actin)為該基因表達(dá)的相對值。 3.計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，應(yīng)用SPSS10.0進(jìn)行t檢驗、方差分析等處理。P＜0.05為差異有顯著性意義。 結(jié)果： 1.正常大鼠

4、肺組織CD14mRNA表達(dá)量低。VV組各組大鼠肺組織CD14mRNA表達(dá)量均明顯高于NC組(P＜0.05)，以6h表達(dá)量最高。從組大鼠染菌后9h、12h、16h、36h肺組織CD14mRNA表達(dá)量仍明顯高于NC組(P＜0.05)，但呈逐漸降低趨勢，至2w時與NC組相比均無明顯差異(P＞0.05)；與相應(yīng)時間點的VV組相比，AA組大鼠染菌9h、12h、16h的肺組織CD14mRNA表達(dá)量均明顯降低(P＜0.05)。 2.正常大鼠肺

5、組織NF-kBmRNA表達(dá)量低。VV組各組大鼠肺組織NF-kBmRNA表達(dá)量均明顯高于NC組(P＜0.05)，以6h表達(dá)量最高。AA組大鼠染菌后9h、12h、16h肺組織NF-kBmRNA表達(dá)量仍顯著高于NC組(P＜0.05)，呈降低趨勢，至36h、2w時與NC組相比無顯著差異(P＞0.05)；與相應(yīng)時間點的VV組相比，AA組大鼠染菌9h、12h、16h的肺組織NF-kBmRNA表達(dá)量明顯降低(P＜0.05)。 3.正常大鼠肺組

6、織IL-18mRNA表達(dá)量較低。VV組各組大鼠肺組織IL-18mRNA表達(dá)量均明顯高于NC組(P＜0.05)，以6h、9h為最高。AA組大鼠染菌后9h、12h、16h、36h肺組織IL-18mRNA表達(dá)量仍明顯高于NC組(P＜0.05)，但呈逐漸降低趨勢，至2w時與NC組比較無顯著性差異(P＞0.05)；與相應(yīng)時間點的VV組相比，AA組大鼠染菌9h、12h、16h肺組織IL-18mRNA表達(dá)量均明顯降低(P＜0.05)。 結(jié)論：