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文檔簡介
1、目的: 應(yīng)用基因芯片技術(shù)初步分析膿毒癥大鼠心臟組織細(xì)胞基因表達(dá)譜的變化。 方法: 雄性wistar大鼠30只,隨機(jī)分為模型組和空白對照組,每組15只。采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)制備大鼠膿毒癥模型,以心臟組織的透射電鏡檢查鑒定模型。應(yīng)用含有22523個(gè)大鼠基因eDNA克隆的表達(dá)譜基因芯片,取Ratio均數(shù)(Ratio Average,RA)>2及RA<0.5的基因?yàn)槟摱景Y表達(dá)差異基因,以計(jì)算機(jī)軟件篩選并分析膿毒癥
2、大鼠心臟組織在CLP后24 h的基因表達(dá)變化,并初步分析表達(dá)差異基因與膿毒癥之間的關(guān)系。 結(jié)果: 心臟組織的透射電鏡檢查提示制模成功℃LP24h后膿毒癥組大鼠心臟組織共篩選出418條與空白對照組相比出現(xiàn)差異表達(dá)的基因,占基因芯片總點(diǎn)數(shù)的1.86%,其中表達(dá)上調(diào)者200條,表達(dá)下調(diào)者218條。在已知功能基因中,表達(dá)上調(diào)者共84條,其中應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因25條,細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因10條,轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)基因4條,免疫反應(yīng)相關(guān)基因
3、6條,離子通道相關(guān)基因4條,細(xì)胞物質(zhì)、能量代謝相關(guān)基因7條,DNA復(fù)制相關(guān)基因2條,生長因子相關(guān)基因2條,癌基因2條,炎癥反應(yīng)相關(guān)基因2條,血管緊張素原、血管緊張素I轉(zhuǎn)化酶基因各1條,其余15條:表達(dá)下調(diào)者共74條,其中細(xì)胞物質(zhì)、能量代謝相關(guān)基因16條,信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因10條,炎癥反應(yīng)相關(guān)基因6條,抗氧化反應(yīng)相關(guān)基因3條,骨架蛋白相關(guān)基因5條,應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因4條,免疫反應(yīng)相關(guān)基因6條,生長因子相關(guān)基因5條,轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)基因2條,離子通
4、道相關(guān)基因1條,DNA修復(fù)相關(guān)基因1條,其余15條。 結(jié)論: ①心臟血管緊張素原基因(Agt)及血管緊張素I轉(zhuǎn)換酶基因(Ace)表達(dá)均上調(diào); ②與G蛋白介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)的基因及基因Cebpb表達(dá)明顯上調(diào); ③胞內(nèi)型糖皮質(zhì)激素受體基因Nrldl表達(dá)下調(diào): ④非特異性免疫相關(guān)基因表達(dá)上調(diào),特異性免疫相關(guān)基因表達(dá)下調(diào): ⑤胰島素樣生長因子相關(guān)基因的表達(dá)下調(diào); ⑥大部分參與基本物質(zhì)、
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