膿毒癥與嚴重膿毒癥患者TGF-β1的差異及膿毒癥大鼠TGF-β1干預作用的研究.pdf

1、目的:膿毒癥病情進展迅速并且病死率高，對其針對性的治療手段目前尚缺乏，是目前急重癥醫(yī)學面臨的難題。目前已證實炎癥因子TGF-β1作為重要調節(jié)因子，參與膿毒癥的炎癥反應，但其作用效應存在爭議，作用機制仍未完全研究清楚。本實驗通過比較不同嚴重程度的膿毒癥患者外周血TGF-β1含量差異，并用盲腸結扎穿孔法復制大鼠膿毒癥模型，動態(tài)觀察不同濃度TGF-β1對膿毒癥大鼠外周血TNF-α及IL-10水平的調節(jié)作用，探討TGF-β1在膿毒癥炎癥反應中的

2、作用及機制。
　　方法:臨床調查:依據(jù)膿毒癥及嚴重膿毒癥診斷標準，將我院急診科2014.6-2014.12收治的16例膿毒癥患者分為膿毒癥組及嚴重膿毒癥組，采集診斷明確后住院第1、2、3、5、7、14天清晨血清樣本，用雙抗體夾心ELISA法測定TGF-β1血清濃度。動物實驗:清潔級健康雄性SD大鼠100只，體重220-250克，隨機分為對照組4只、膿毒癥模型組16只、TGF-β1干預組80只，按不同給藥濃度將TGF-β1干預組分為

3、5ng/(ml·250g)組、10ng/(ml·250g)組、20ng/(ml·250g)組、50/(ml·250g)ng組、100ng/(ml·250g)組，每組16只，膿毒癥模型組及TGF-β1干預組第6小時、第12小時、第24小時、第48小時分別隨機選取4只大鼠采血。以盲腸結扎穿孔法建立膿毒癥大鼠模型，膿毒癥模型組于造模后0.5小時經尾靜脈注射生理鹽水1ml，TGF-β1干預組于造模后0.5小時經尾靜脈注射不同濃度的TGF-β1。

4、采用ELISA法檢測各組大鼠血清中TNF-α、IL-10濃度變化，采血后活殺大鼠，留取大鼠肺臟、腎臟組織制備HE病理染色切片，觀察組織形態(tài)學改變。將收集的數(shù)據(jù)結果應用SPSS20.0進行統(tǒng)計描述，采用U檢驗和卡方檢驗分析各組差異，當P＜0.05時為有統(tǒng)計學意義。
　　結果:膿毒癥患者外周血TGF-β1含量與膿毒癥嚴重程度相關，膿毒癥越重，TGF-β1水平越高。隨著TGF-β1給藥濃度的增高，IL-10的水平也逐漸增高，高濃度的TG

5、F-β1可提高抗炎介質IL-10的水平。不同濃度的TGF-β1對促炎因子TNF-α水平影響不同，當TGF-β1濃度為50 ng/(ml·250g)時TNF-α水平升高，促進TNF-α的合成，當給藥濃度為100 ng/(ml·250g) TNF-α水平呈下降趨勢，抑制TNF-α的合成。對比CLP術后24h，TGF-β1干預組與膿毒癥模型組組織形態(tài)學變化發(fā)現(xiàn)在低劑量TGF-β1干預組腎臟、肺臟組織炎癥細胞浸潤較膿毒癥模型組加劇，組織細胞壞死