真姬菇液體發(fā)酵工藝優(yōu)化及發(fā)酵產(chǎn)物分析.pdf

1、真姬菇(Hypsizigus marmoreus)是一種營(yíng)養(yǎng)豐富的食用兼藥用的珍稀食用菌，也是一種極具潛力的生產(chǎn)品種。然而，由于傳統(tǒng)的真姬菇栽培方式--固體菌種栽培具有周期長(zhǎng)、效率低、商品價(jià)值低下等存在的問(wèn)題，所以限制了真姬菇的工廠(chǎng)化和規(guī)?；l(fā)展。本研究通過(guò)正交試驗(yàn)等方法對(duì)真姬菇液體發(fā)酵工藝進(jìn)行了優(yōu)化，并與真姬菇傳統(tǒng)固體菌種的栽培模式進(jìn)行了比較，并通過(guò)化學(xué)、GC-MS化學(xué)指紋圖譜等分析手段對(duì)其發(fā)酵產(chǎn)物化學(xué)成分進(jìn)行了分析，這為真姬菇的產(chǎn)業(yè)

2、化生產(chǎn)以及進(jìn)一步開(kāi)發(fā)真姬菇功能性食品提供了理論基礎(chǔ)和應(yīng)用價(jià)值。主要研究結(jié)果如下： 1、研究了營(yíng)養(yǎng)性因子對(duì)真姬菇真9603菌株深層發(fā)酵的影響，通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)的方法對(duì)其生長(zhǎng)的最適培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化。采用深層培養(yǎng)方法篩選出了真9603菌株液體深層發(fā)酵較優(yōu)的碳源和氮源，研究結(jié)果表明，馬鈴薯、葡萄糖、酵母粉有利于真姬菇真9603菌株菌絲體的生長(zhǎng)，進(jìn)一步的正交優(yōu)化結(jié)果確定了真姬菇真9603菌株深層發(fā)酵最適的培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯20％、葡

3、萄糖3％、酵母粉0.2％、KH2PO40.1％、MgSO4-7H2O0.1％。 2、采用搖瓶培養(yǎng)方法對(duì)真姬菇真9603菌株的深層培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，真姬菇真9603菌株深層培養(yǎng)的最佳條件是：搖瓶柜的轉(zhuǎn)速為120r/min，培養(yǎng)溫度20℃，起始pH值6.0-7.5(一般不需調(diào)pH值)，接種量為5mL 左右(250mL 錐形瓶，100mL 瓶裝量)，即接種量5％，搖瓶裝量為100mL(250mL 錐形瓶)。 3、研

4、究了真姬菇真9603菌株液體菌種培養(yǎng)過(guò)程中菌球數(shù)量、pH值、還原糖含量、氨基氮含量以及相關(guān)酶活性等指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化情況。研究結(jié)果表明，真姬菇液體發(fā)酵產(chǎn)菌球的數(shù)量和活性與其它指標(biāo)具有一定的相關(guān)性。當(dāng)培養(yǎng)液中的還原糖含量和氨基氮含量分別為0.98g/100mL和7.52mg/100mL，羧甲基纖維素酶活性和蛋白酶活性分別為7.85U和12.6U，pH為5.20時(shí)，菌球數(shù)量(60個(gè)/mL)與活性達(dá)到最高，發(fā)酵終點(diǎn)確定為培養(yǎng)后第7天。 4

5、、進(jìn)行了真姬菇液體菌種與固體菌種的對(duì)比應(yīng)用試驗(yàn)，并進(jìn)行了相關(guān)的效益分析。研究結(jié)果表明，與采用固體菌種的栽培模式相比，采用液體菌種栽培具有周期短、出菇整齊、生產(chǎn)效率高等優(yōu)勢(shì)，這充分說(shuō)明了真姬菇液體菌種具有良好的應(yīng)用前景。接種量以每袋15mL的效果最好：在0-25℃的溫度范圍內(nèi)，真9603菌株液體菌種的活力與保藏溫度和保藏時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，其最適貯藏溫度為0-10℃，最適的保藏時(shí)間為3-9天；其液體菌種穿刺接種的日均生長(zhǎng)2.21mm,液體菌種表

6、面接種的日均生長(zhǎng)1.71mm，固體菌種菌絲的日均生長(zhǎng)1.2lmm。其液體菌種穿刺接種的生物學(xué)效率可以達(dá)到64.80％，液體菌種表面接種的生物學(xué)效率可以達(dá)到63.40％，固體菌種菌絲的生物學(xué)效率僅為51.00％。真姬菇在液體菌種栽培模式下出菇比固體栽培模式下更整齊，而其它的性狀差異并不明顯。 5、對(duì)真姬菇真9603菌株的發(fā)酵液化學(xué)成分進(jìn)行初步測(cè)定，系統(tǒng)的預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明發(fā)酵液中含有氨基酸、蛋白質(zhì)及多肽、有機(jī)酸、皂甙、黃醌及其甙類(lèi)物質(zhì)

7、、內(nèi)酯、香豆素及其甙類(lèi)，葸醌及其甙類(lèi)、揮發(fā)油、酚類(lèi)物質(zhì)、強(qiáng)心甙、植物甾醇，三萜等物質(zhì)；不含生物堿、鞣質(zhì)、氰酐等物質(zhì)。通過(guò)GC-MS測(cè)試，確定真姬菇真9603菌株發(fā)酵液的揮發(fā)性氣體中含有烷烴類(lèi)、醇類(lèi)、酮類(lèi)、醛類(lèi)及其它類(lèi)別的一些物質(zhì)，其中醇類(lèi)物質(zhì)和酮類(lèi)物質(zhì)的含量相對(duì)較高，分別為7.46％和7.13％。本實(shí)驗(yàn)也對(duì)真姬菇真9603菌株發(fā)酵液的氯仿萃取相中的物質(zhì)進(jìn)行了成分鑒定，結(jié)果表明，氯仿萃取相中含有烷烴類(lèi)物質(zhì)，酚類(lèi)物質(zhì)，酯類(lèi)物質(zhì)，醇類(lèi)物質(zhì)、酮