S100A8-A9在新生大鼠膿毒血癥腸損傷中的表達變化及意義.pdf

1、目的:本研究通過建立新生大鼠膿毒血癥模型來觀察S100A8/A9在腸道組織中的表達及炎癥因子TNF-ɑ水平的變化,分析S100A8/A9在新生大鼠膿毒血癥引起的腸道損傷中的作用,并觀察雙歧桿菌對腸道損傷是否存在保護作用,以期尋找潛在的腸損傷的標志物及可能的干預靶點。
　　方法:選用128只Sprague-Dawley(SD)新生大鼠采用LPS腹腔注射的方法建立膿毒血癥模型,雌雄不限,隨機分四組:LPS組、雙歧桿菌+LPS組、雙歧桿

2、菌組、空白對照組,每組n=32。LPS組:大鼠7日齡時腹腔注射LPS(100ug/kg)。雙歧桿菌+LPS組:大鼠1日齡開始采用0.04g(含2億個活菌)雙歧桿菌灌胃(用PH7.4的生理鹽水配制0.2ml/只),每天一次,持續(xù)一周,7日齡時腹腔注射LPS。雙歧桿菌組:每只1日齡大鼠采用雙歧桿菌灌胃,每天一次,持續(xù)一周;7日齡時腹腔注射LPS組等量生理鹽水(NS)。空白對照組:大鼠7日齡時腹腔注射LPS組等量生理鹽水。各組于LPS/NS注

3、射后2、6、12、24小時取樣,每個時間點隨機抽取8只采集腸道組織。使用Real-time PCR方法檢測腸道中S100A8、S100A9、TNF-ɑ的mRNA水平,免疫組織化學分析方法檢測腸道S100A8/A9蛋白分子的表達。
　　結果:Real-time PCR結果顯示:(1)和空白對照組相比,LPS組大鼠腸道組織中S100A8、S100A9、TNF-ɑ的mRNA水平均出現(xiàn)明顯升高。注射LPS后2小時S100A8mRNA開始出

4、現(xiàn)表達升高(P<0.01),10小時左右達到峰值,此后至24小時一直維持在較高水平。S100A9mRNA變化趨勢和S100A8相似。TNF-ɑmRNA于2小時后亦出現(xiàn)升高(P<0.01),至12小時表達量達到最大值,此后平臺期延續(xù)至24小時左右。(2)雙歧桿菌+LPS組變化趨勢較LPS組緩和,注射LPS后6小時S100A8mRNA表達量出現(xiàn)緩慢增加(P<0.05),并延續(xù)至12小時達平臺期,但此時其表達量不及LPS組的二分之一,24小時

5、開始出現(xiàn)下降趨勢。S100A9變化趨勢相似,24小時下降趨勢較S100A8明顯。24小時內(nèi) TNF-ɑ的變化幅度略高于S100A8,但變化趨勢基本保持同步。(3)雙歧桿菌組大鼠腸道組織和空白對照組各炎癥因子未見明顯差異。
　　結論:1、新生大鼠腹腔注射LPS構建膿毒血癥模型能夠誘發(fā)腸道損傷,且腸道組織中S100A8/A9表達水平和炎癥反應程度呈正相關,提示S100A8/A9是參與膿毒血癥腸道損傷的重要因子。
　　2、雙歧桿菌