類受體激酶StLRPK1參與的抗病信號途經分析.pdf

1、馬鈴薯（Solanum tuberosum L.）是世界第四大糧食作物。晚疫病是馬鈴薯生產中面臨的最大威脅，病害爆發(fā)導致大規(guī)模減產。前期研究中克隆到一個類受體激酶基因StLRPK1，初步研究表明StLRPK1對馬鈴薯晚疫病具有廣譜抗性。本研究以超量表達StLRPK1的轉基因本氏煙草為材料，進一步研究StLRPK1在晚疫病抗性中的作用，探究StLRPK1介導的抗病信號傳遞途徑，解析StLRPK1的抗病機制。主要結果如下:
　　1.利

2、用卡那霉素抗性篩選方法篩選得到超量表達StLRPK1的純合本氏煙草株系。純合株系接種晚疫病原菌小種88069進行抗性鑒定，結果表明StLRPK1超量株系晚疫病抗性顯著高于對照。
　　2.利用qRT-PCR分析了超量表達StLRPK1本氏煙草株系接種前后PTI marker基因表達。未接種晚疫病菌時，與野生型相比，超量株系中PTI相關marker基因呈上調表達趨勢;病原菌誘導24 h表達分析顯示，在超量株系中多個PTI抗性相關基因更

3、大幅度上調表達，證明StLRPK1可以通過調控下游PTI抗性相關基因的表達來提高對晚疫病的抗性。
　　3.利用VIGS系統(tǒng)探索了StLRPK1參與的信號途徑。結果顯示VIGS沉默NbSIPK后野生型和超量株系出現(xiàn)相同程度抗性下降，說明NbSIPK不參與StLRPK1介導的抗性，VIGS沉默Nb WIP后超量株系抗性下降程度顯著高于野生型，表明StLRPK1可能通過NbWIPK傳遞抗病信號。
　　4.利用煙草葉片瞬時表達體系對

4、StLRPK1進行亞細胞定位，結果顯示StLRPK1定位于細胞膜上。
　　5.用StLRPK1激酶域構建酵母雙雜交誘餌載體，篩選馬鈴薯-病原菌互作蛋白cDNA文庫，沒有篩選到互作蛋白，在StLRPK1與StBAK1的點對點雜交實驗中沒有檢測到互作。
　　6.轉錄組分析表明，干涉StLRPK1的馬鈴薯株系與對照E3相比，多個蛋白激酶組成型下調表達，誘導24 h后，更多激酶相對下調表達的同時大量轉錄因子下調表達。StLRPK1可