抗病信號(hào)傳導(dǎo)基因RAR1在小麥抗病基因工程中的應(yīng)用.pdf

1、近年來，小麥白粉病、條銹病、紋枯病等病害已成為影響小麥生產(chǎn)的重要限制因素之一。加強(qiáng)抗病反應(yīng)機(jī)制研究非常重要。目前，我國(guó)小麥品種中白粉病、條銹病抗性大多由單基因控制，與病原菌無毒基因之間作用方式大多遵循“基因?qū)颉钡募僬f。 RAR1編碼的蛋白是最早報(bào)道的植物防衛(wèi)信號(hào)蛋白。首次是從大麥抗白粉病基因Mla12介導(dǎo)的抗病信號(hào)途徑中分離的一個(gè)重要信號(hào)元件。隨后的大量研究發(fā)現(xiàn)，在大麥中RAR1是許多抗白粉病基因Mla介導(dǎo)抗性所必須的。RA

2、R1編碼一個(gè)大約25.5kD的鋅結(jié)合蛋白，包含有一個(gè)CCCH結(jié)構(gòu)域，兩個(gè)由60個(gè)氨基酸組成的鋅結(jié)合域(zine-bindinddomains)CHORD-Ⅰ和CHORD-Ⅱ(cysteineandhistidine-richdomain)。RAR1在多種植物對(duì)真菌、細(xì)菌和病毒的抗性中均是必要的信號(hào)分子。 為研究RAR1在小麥抗病途徑中的作用，本課題組從抗病中間偃麥草(Thinopyrumintermedium)中分離克隆出RAR

3、1基因，將RAR1基因置換質(zhì)粒pAHC25上的GUS基因，正確構(gòu)建了單子葉高效表達(dá)載體pURAR1，其中RAR1基因受來自玉米的Ubiquitin啟動(dòng)子控制，篩選基因?yàn)锽AR基因。 采用基因槍法轉(zhuǎn)化小麥推廣品種揚(yáng)麥11、12幼胚愈傷組織3044個(gè)，經(jīng)過2-3次Bialaphos篩選，獲得265株再生植株，通過PCR檢測(cè)獲得陽性植株23株，轉(zhuǎn)化率為0.76％。 對(duì)T1代轉(zhuǎn)基因材料進(jìn)行PCR檢測(cè)，檢測(cè)到23株陽性植株，分離比