DAXX通過AR-SREBP-2信號通路下調HepG2細胞中膽固醇的合成.pdf

1、高膽固醇血癥是動脈粥樣硬化斑塊形成和發(fā)展的危險因子之一，雄激素受體作為膽固醇合成相關基因最重要的核轉錄調控因子，被證實很可能通過與死亡結構域相關蛋白相互結合而喪失轉錄激活功能，但其具體分子機制還有待進一步驗證。
　　目的：為了證實在HepG2細胞中DAXX可以與AR相互結合并抑制其轉錄調控的膽固醇合成相關基因的轉錄。
　　方法：穩(wěn)定轉染pCDNA3.1(+)/DAXX至體外培養(yǎng)的HepG2細胞中，終濃度為1μmol/L的丙酸

2、睪酮處理DAXX過表達的HepG2細胞24 h，采用siRNA耗干擾竭內源性DAXX，采用免疫共沉淀法檢測DAXX與AR的相互結合，應用油紅O染色法、酶偶聯(lián)比色法和高效液相法檢測細胞中總膽固醇的含量，Western Blotting和RT-qPCR法檢測AR、SREBP-2和HMGCR的表達水平。
　　結果：在HepG2細胞中 DAXX和 AR可以相互結合，但并不影響AR的轉錄表達；外源性DAXX過表達的HepG2細胞中總膽固醇的