壓應(yīng)力通過調(diào)節(jié)SREBP-1-小凹蛋白-1信號通路促進(jìn)ox-LDL誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞膽固醇蓄積.pdf

1、目的：觀察壓應(yīng)力對平滑肌細(xì)胞膽固醇蓄積的影響及其與SREBP-1/Caveolin-1信號通路的關(guān)系。 方法：首先以血管平滑肌細(xì)胞（A10）為研究對象，不同壓應(yīng)力（0，60， 90,120,150，180mmHg）作用下，以50mg/Lox-LDL作用于平滑肌細(xì)胞48小時,油紅O初步檢測細(xì)胞荷脂情況，高效液相色譜分析法檢測細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇，總膽固醇含量；并計(jì)算膽固醇酯/總膽固醇的值，RT-PCR檢測caveolin-1，SREB

2、P-1，ApoE的mRNA的表達(dá)情況Western 印跡法檢測caveolin-1，SREBP-1，SR-B1蛋白的表達(dá)情況， 結(jié)果：在不同壓應(yīng)力（0，60,90,120,150，180mmHg）作用的條件下，ox-LDL誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞48小時，油紅O染色，觀察到細(xì)胞仍為長梭形，但是隨著壓力的增加，細(xì)胞胞漿體積擴(kuò)大，脂滴明顯增多。細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇的含量分別為60.5±2.8，71.2±3.4,90.1±9.1,110.5±2

3、2.1,133.5±11.1,150.8±9.4mg/g，總膽固醇的含量分別為92.3±2.1，122.8±12.3,163.8±9.9,245.6±7.8,317.9±5,386.7±6.4mg/g,膽固醇酯/總膽固醇的比值分別為30℅,42﹪,45﹪,55﹪,58﹪.61﹪. RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)壓應(yīng)力使caveolin-1，SREBP-1，ApoE mRNA的表達(dá)明顯下調(diào)。 Western blotting檢測caveolin-1