關(guān)于ox-LDL誘導(dǎo)骨髓來(lái)源的平滑肌樣細(xì)胞體外轉(zhuǎn)分化為泡沫樣細(xì)胞的研究.pdf

1、血管平滑肌細(xì)胞是動(dòng)脈粥樣斑塊中一種主要的細(xì)胞成分，在血管疾病的發(fā)展過(guò)程中起重要作用。與終末分化的骨骼肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞不同，成年動(dòng)物體內(nèi)的平滑肌細(xì)胞在局部微環(huán)境的各種因素誘導(dǎo)下，仍然具有高度的可塑性和可逆的表型變化特性。在早期的動(dòng)脈粥樣病變中，平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化表現(xiàn)為平滑肌表面標(biāo)志基因的表達(dá)減少、細(xì)胞增殖率升高以及細(xì)胞合成細(xì)胞外基質(zhì)的增加。在動(dòng)脈粥樣硬化病損中，平滑肌細(xì)胞表面ox-LDL的吞噬受體表達(dá)上調(diào)能夠使其轉(zhuǎn)化為泡沫樣細(xì)胞。雖然對(duì)中

2、膜平滑肌細(xì)胞遷移和增殖的分子機(jī)制作了大量研究，但是至今仍然未能找到抑制血管阻塞性重建的有效治療方法。
　　 有研究表明骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是平滑肌祖細(xì)胞的一個(gè)非常重要來(lái)源，這些骨髓來(lái)源的平滑肌祖細(xì)胞能夠歸巢到血管病損處并分化為平滑肌樣細(xì)胞細(xì)胞參與冠脈搭橋術(shù)后的再狹窄、移植后再狹窄以及高脂血癥所致的動(dòng)脈粥樣硬化等病變。但對(duì)于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中能夠特異性分化為平滑肌系的祖細(xì)胞研究卻并不多見(jiàn)。其原因之一為骨髓中的平滑肌祖細(xì)胞與其他幾種祖細(xì)

3、胞系同時(shí)存在，將其分離純化存在一定困難。
　　 雖然大量研究表明ox-LDL能夠促進(jìn)血管的炎癥并且促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展，但是ox-LDL對(duì)骨髓來(lái)源的平滑肌樣細(xì)胞(SMLC)的分化和轉(zhuǎn)分化作用卻未見(jiàn)報(bào)道。Ox-LDL受體在骨髓來(lái)源的平滑肌樣細(xì)胞(SMLC)中是否表達(dá)以及其在動(dòng)脈粥樣硬化中對(duì)平滑肌樣細(xì)胞分化所起的作用目前仍不十分清楚。本研究旨在探討ox-LDL受體LOX-1介導(dǎo)骨髓來(lái)源平滑肌樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化作用。為骨髓源性干祖

4、細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用機(jī)制提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 本研究采用組織特異性啟動(dòng)子結(jié)合流式分選的方法，用帶有SM22啟動(dòng)子的綠色熒光蛋白質(zhì)粒重組體Psm22－eGFP-1將平滑肌祖細(xì)胞（SMPC）從骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中分離純化出來(lái)。分離出的平滑肌祖細(xì)胞myocardin+CD105+KDR+CD31-CD45-CD34-，但并不表達(dá)平滑肌細(xì)胞特異性的標(biāo)志物（α-SMA、SM22、smoothelin和 SM-MHC)。在用PDGF

5、-BB長(zhǎng)時(shí)間誘導(dǎo)后，SMPC逐漸表達(dá)α-SMA、SM22和SM-MHC而分化為平滑肌樣細(xì)胞（SMLC）。當(dāng)SMLC與不同濃度ox-LDL共培養(yǎng)之后，SMLC表面的LOX-1表達(dá)隨著ox-LDL濃度升高而增多，同時(shí)myocardin和平滑肌表面特異性標(biāo)志基因的表達(dá)逐漸減少。在LOX-1表達(dá)上調(diào)的同時(shí)，SMLC的吞噬功能增強(qiáng)，在其細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)脂滴聚集，成為泡沫樣細(xì)胞。
　　 本研究表明在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中存在myocardin+C