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
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文檔簡介
1、[目的]:研究氧誘導的視網(wǎng)膜新生血管形成的機制及防治方法。
[方法]:20只新生C57BL/6J小鼠隨機分為對照組和實驗組,各10只。實驗組P7置75%氧濃度環(huán)境中,P12返回正??諝庵?,對照組始終置于正常空氣環(huán)境中,P17行熒光素灌注造影、視網(wǎng)膜鋪片及病理切片,觀察視網(wǎng)膜新生血管生成情況;幼鼠P12、P14、P17對照組和實驗組各6只,取視網(wǎng)膜,應用realtime-PCR定量檢測各時間點Annexin A2mRNA和T
2、PAmRNA水平;HSS治療組10只OIR模型小鼠腹腔注射飽和氫鹽水、HSS對照組10只OIR模型小鼠腹腔注射生理鹽水,正常組10只小鼠分別于P17用高分子量熒光素灌注造影觀察血管分布與形態(tài),HE染色計數(shù)突破內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細胞核數(shù),用realtime-PCR和免疫組化檢測視網(wǎng)膜VEGF表達,并測定丙二醛含量。
[結(jié)果]:1.熒光素灌注造影結(jié)果顯示實驗組小鼠視網(wǎng)膜中央呈無灌注區(qū)域,視網(wǎng)膜血管迂曲擴張、熒光素滲漏,對照組小鼠
3、視網(wǎng)膜血管分布均勻,未見無灌注區(qū)和熒光素滲漏;病理切片可見實驗組小鼠突破內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細胞核數(shù)為79.70±7.57,對照組為0.28±0.12,兩組具有顯著差異(P<0.01)。2.P12和P17時,實驗組與對照組Annexin A2mRNA和TPA mRNA的表達量無顯著差異(P>0.05);P14時,實驗組Annexin A2mRNA和TPA mRNA表達量均比對照組高,且具有顯著差異(P<0.01)。3.HSS治療組熒光素灌注
4、造影未見無灌注區(qū)、新生血管叢及熒光素滲漏;HSS對照組熒光素灌注造影視網(wǎng)膜視乳頭周邊可見大片無灌注區(qū),視網(wǎng)膜血管不規(guī)則擴、迂曲,無灌注區(qū)周圍可見大量新生血管叢,伴明顯熒光素滲漏;正常組熒光素灌注造影視網(wǎng)膜未見無灌注區(qū)及熒光素滲漏。病理切片結(jié)果顯示HSS治療組、HSS對照組和正常組突破內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細胞核數(shù)分別為41.00±8.01、79.70±7.57和0.90±1.28,HSS治療組與正常組無統(tǒng)計學差異(P>0.05),HSS治療組
5、與HSS對照組具有顯著差異(P<0.01);免疫組織化學實驗顯示VEGF表達于神經(jīng)節(jié)細胞層、內(nèi)核層和色素上皮細胞層,VEGF蛋白陽性表達HSS治療組、HSS對照組和正常組分別為1.46±0.01、2.92±0.70和1.30±0.06;HSS治療組、HSS對照組和正常組VEGFmRNA表達量分別為1.94±0.12、7.40±0.04和1.00±0.03,HSS治療組與正常組之間無統(tǒng)計學意義(P>0.05),HSS治療組與HSS對照組有
6、顯著性差異(P<0.01);小鼠視網(wǎng)膜中MDA含量HSS治療組為16.07±1.05 nmol/mg prot,HSS對照組為22.42±2.24 nmol/mg prot,正常組為5.17±4.23 nmol/mg prot,HSS治療組與HSS對照組具有顯著差異(P<0.01),正常組與HSS對照組有顯著差別(P<0.01)。
[結(jié)論]:氧誘導視網(wǎng)膜新生血管小鼠模型穩(wěn)定、可靠、重復性高,可做為研究視網(wǎng)膜新生血管疾病發(fā)病
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