雌、孕激素對人早孕蛻膜基質(zhì)細胞中BAFFR和Bcl-2-Bax表達的影響.pdf

1、第一部分: 雌、孕激素對人早孕蛻膜基質(zhì)細胞中BAFFR表達影響的研究。 研究背景：妊娠后，蛻膜化的子宮內(nèi)膜和發(fā)育著的滋養(yǎng)層細胞共同構(gòu)成了母-胎界面。蛻膜基質(zhì)細胞（decidual stormal cells DSC）是蛻膜組織的主要組成成分，在維持母體界面的免疫耐受發(fā)揮重要作用。大量的研究已證實腫瘤壞死因子（TNF）超家族成員參與免疫豁免過程，在胎盤的增殖及分化中發(fā)揮重要作用。B淋巴細胞激活因子（B cells-activati

2、ng factor， BAFF）是TNF超家族的新成員，Phillips TA等發(fā)現(xiàn)BAFF表達于母-胎界面處，并證實胎盤滋養(yǎng)細胞層BAFF/BAFFR系統(tǒng)有利于正常妊娠胎盤的自身穩(wěn)定、生長和重塑。在前期的研究中觀察到妊娠早期蛻膜組織表達BAFF，推測其可能與早孕期母-胎界面免疫耐受的形成有關。BAFFR是BAFF的特異性受體，關于其在蛻膜組織中表達的研究尚未見相關報道?；诖耍狙芯繑M觀察人早孕蛻膜基質(zhì)細胞（decidual stro

3、mal cells，DSC）中BAFFR的表達情況及雌、孕激素對其表達的的影響。 研究目的：觀察雌、孕激素對體外培養(yǎng)的人早孕蛻膜基質(zhì)細胞（decidual stromal cells，DSC）中B淋巴細胞刺激因子受體3（B cells-activating factor receptor3，BR3，也稱BAFFR）表達的影響，初步探討其在胚胎植入調(diào)控和母胎免疫平衡中的作用，為病理性妊娠的診療提供基礎實驗數(shù)據(jù)。 研究方法：

4、選取正常早孕婦女人工流產(chǎn)蛻膜組織，分離、提純DSC，培養(yǎng)于含10％去激素胎牛血清培養(yǎng)基內(nèi)，分為雌二醇（Estradiol，E2）、孕酮（Progesterone，P4）、雌二醇孕酮聯(lián)合（E2+P4）和空白對照（Control，C）組，培養(yǎng)96h。MTT檢測細胞的增殖能力；real-time PCR檢測BAFFR mRNA；流式細胞術檢測BAFFR蛋白。 結(jié) 果：與空白對照組相比，各實驗組DSC增殖能力及BAFFR mRNA水平均

5、無明顯變化（P>0．05）；流式細胞術檢測顯示BAFFR蛋白定位于DSC胞內(nèi)，且E2+P4可顯著上調(diào)其表達（P<0．05）。 結(jié) 論：正常人早孕DSC表達高水平的BAFFR，雌孕激素聯(lián)合對其有顯著的上調(diào)作用，提示BAFFR可能參與胚胎植入的調(diào)控及早孕期母-胎界面的免疫調(diào)節(jié)，對臨床各種病理性妊娠如稽留流產(chǎn)，妊娠滋養(yǎng)細胞疾病，妊娠期高血壓等的防治具有重要的作用。 第二部分：雌、孕激素對人早孕蛻膜基質(zhì)細胞中Bcl-2/Bax表

6、達影響的研究。 研究背景：細胞凋亡在維持機體正常形態(tài)及功能方面起重要作用，胎盤組織中也存在著細胞凋亡。妊娠后，在子宮內(nèi)膜蛻膜化的過程中，內(nèi)膜細胞的分化和凋亡對妊娠免疫耐受和限制滋養(yǎng)細胞的過度侵襲具有重要的作用。因此，胎盤細胞凋亡與孕卵著床、胎盤形成和重構(gòu)關系密切，隨妊娠進展，逐漸增加的胎盤細胞凋亡率，可能在胎盤發(fā)育和分化過程中發(fā)揮重要作用。但是，妊娠后DSC凋亡的具體機制仍不清楚。 細胞凋亡受多種基因產(chǎn)物的調(diào)控，如細胞因

7、子，白介素和甾體激素等。Bcl-2家族是細胞凋亡的重要調(diào)節(jié)因子，Bax作為此家族中一員，同Bcl-2作用相反，主要是促進細胞的凋亡；有研究顯示Bcl-2/Bax系統(tǒng)有利于胚胎植入過程中局部免疫耐受形成，母體甾體激素可能參與調(diào)控胎盤凋亡過程，然而，目前在體外應用雌、孕激素刺激蛻膜組織，探討其對蛻膜組織凋亡影響的研究較少。 研究目的：通過觀察雌、孕激素對體外培養(yǎng)的DSC凋亡和Bax/Bcl-2蛋白表達的影響，初步探討其對早孕期子宮內(nèi)

8、膜容受性的調(diào)控作用，為病理性妊娠的診療提供基礎實驗數(shù)據(jù)。 方法和結(jié)果：選取正常早孕婦女人工流產(chǎn)蛻膜組織，分離、提純DSC，培養(yǎng)于含10％去激素胎牛血清培養(yǎng)基內(nèi)，分為雌二醇（Estradiol，E2）、孕酮（Progesterone，P4）、雌二醇孕酮聯(lián)合（E2+P4）和空白對照（Control，C）組，培養(yǎng)96h。MTT檢測細胞的增殖能力；流式細胞術檢測DSC的凋亡率和Bcl-2/Bax蛋白的表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比各實驗組

9、DSC增值能力無明顯差異（P>0．05），而雌孕激素聯(lián)合刺激DSC后可顯著上調(diào)其凋亡率和胞內(nèi)Bax的表達（P<0．05），但單一雌或孕激素刺激后DSC凋亡率和Bax表達無顯著性變化（P>0．05）；流式細胞術在各組DSC中均為檢測到Bcl-2的表達。 結(jié) 論：本研究結(jié)果表明雌孕激素聯(lián)合刺激DSC可能通過上調(diào)其Bax表達來促進自身凋亡，此作用有利于妊娠早期子宮內(nèi)膜容受性的形成，為各種病理性妊娠的防治和提高體外受精胚胎移植（IVF-