脂多糖對(duì)人蛻膜細(xì)胞中PR及TNF-α表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：通過采用脂多糖作用體外培養(yǎng)人蛻膜細(xì)胞，研究脂多糖對(duì)人蛻膜細(xì)胞中孕激素受體(PR)和TNF-α的表達(dá)改變，探討細(xì)菌感染導(dǎo)致自然流產(chǎn)的發(fā)病機(jī)理。
　　 方法：收集正常早孕人工流產(chǎn)病例10例，分離人原代蛻膜細(xì)胞，用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)胎盤泌乳素鑒定蛻膜基質(zhì)細(xì)胞。取培養(yǎng)傳代第4、5代細(xì)胞加入脂多糖(其終濃度分別為25ng/ml50ng/ml
　　 100ng/ml200ng/ml)處理24h為實(shí)驗(yàn)組一至四組，僅加入細(xì)胞培養(yǎng)液

2、為對(duì)照組。采用激光共聚焦-細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測(cè)各組蛻膜細(xì)胞中PR及TNF-α的Cy3熒光表達(dá)，用Image J圖像分析軟件分析PR及TNF-α的熒光強(qiáng)度，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)方差分析比較不同濃度LPS對(duì)蛻膜細(xì)胞中PR及TNF-α表達(dá)的變化。并用線性相關(guān)分析法對(duì)各組蛻膜細(xì)胞的PR及TNF-α的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果：1.人原代蛻膜細(xì)胞體外培養(yǎng)分離成功，經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)蛻膜細(xì)胞胎盤泌

3、乳素陽性率95％。2.實(shí)驗(yàn)組蛻膜細(xì)胞中PR平均熒光強(qiáng)度較對(duì)照組明顯降低，且隨著脂多糖濃度逐漸增加，PR的平均熒光強(qiáng)度降逐漸降低，差異顯著性，P<0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.實(shí)驗(yàn)組蛻膜細(xì)胞中TNF-α平均熒光強(qiáng)度較對(duì)照組明顯增強(qiáng)，且隨著脂多糖濃度增大，蛻膜細(xì)胞內(nèi)TNF-α熒光強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，差異有顯著性，P<0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.蛻膜細(xì)胞中，PR與TNF-α表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.841，P<0.01)。
　　 結(jié)論：1.脂多