脂多糖對(duì)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞PTEN表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、研究目的:支氣管肺發(fā)育不良(Bronchopulmonary dysplasia,BPD)是一種常見于早產(chǎn)兒的慢性肺損傷疾病,炎癥是造成肺損傷的主要因素之一。近年來研究發(fā)現(xiàn)BPD的發(fā)生發(fā)展可能與肺泡上皮細(xì)胞過度凋亡相關(guān)。PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten)可以通過調(diào)控PI3K/AKT,MAPK等多種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯及凋亡,抑制

2、細(xì)胞生長(zhǎng),其表達(dá)變化與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)擬探討脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)對(duì)大鼠肺泡II型上皮細(xì)胞(alveolar epithelial cell Ⅱ,AECII)PTEN表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響。
　　研究方法:采用胰酶及膠原酶消化法,消化孕19d的SD大鼠胎肺組織后,經(jīng)差數(shù)離心及反復(fù)貼壁法,分離純化大鼠肺泡II型上皮細(xì)胞并進(jìn)行原代培養(yǎng),經(jīng)AKP染色及SP-C免疫熒光鑒定細(xì)胞純度后,隨機(jī)分為對(duì)照組和

3、LPS(100ug/ml)干預(yù)組,Western blotting檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)(0、6、12、24、48h)Caspase-3、PTEN蛋白表達(dá)。
　　研究結(jié)果:Caspase-3的表達(dá)在對(duì)照組中于24h達(dá)高峰,LPS組中隨著干預(yù)時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸升高,同樣于24h達(dá)高峰并于48h表達(dá)降低,與對(duì)照組相比,12h,24h蛋白表達(dá)明顯增加(p<0.05),并且在24h可檢測(cè)到Caspase-3活化片段,6h,48h Caspase-3表

4、達(dá)無差異;PTEN在對(duì)照組各時(shí)相呈較穩(wěn)定表達(dá),在LPS組12h蛋白表達(dá)高于6h,于24h出現(xiàn)表達(dá)降低,與24h相比,48h蛋白表達(dá)明顯降低(p<0.05),與對(duì)照組相比6h,12hPTEN表達(dá)顯著增高(p<0.05);
　　結(jié)論:LPS誘導(dǎo)的AECII凋亡為Caspase-3依賴途徑;凋亡與LPS干預(yù)存在時(shí)相關(guān)系;LPS對(duì)AECII PTEN表達(dá)有一定影響,但PTEN的表達(dá)可能與其誘導(dǎo)的AECII Caspase-3表達(dá)增高及凋亡