全氟化碳對脂多糖致肺泡表面Ⅱ型上皮細胞損傷時MAPK細胞信號通路的影響.pdf

1、目的:
　　ALI/ARDS是一種常見的呼吸系統(tǒng)危重癥,發(fā)病率和死亡率較高。大量中性粒細胞浸潤過度釋放炎性介質(zhì)導致肺泡毛細血管膜損傷,引起通氣氧合障礙是其主要發(fā)病機理。全氟化碳( Perfluorocarbon PFC)作為液體通氣介質(zhì)被用于ALI/ARDS治療,可以顯著改善氧和及肺功能,減少中性粒細胞浸潤,但其作用機制尚未完全闡明。本研究擬觀察PFC對LPS至肺泡II型上皮細胞趨化因子MIP-1α,MIP-2,MCP-1表達與M

2、APK信號通路的變化關系,為PFC治療ALI/ARDS提供新的理論基礎及實驗依據(jù)。
　　方法:
　　(1)用PFC干預LPS誘導的A549急性肺損傷細胞模型,細胞分為空白對照組(C),LPS刺激組(LPS),LPS+PFC干預組(L+P),PFC干預組(PFC)四組,應用熒光實時定量PCR和ELISA檢測各組細胞在干預1、2、4、6、8、12h時MIP-1α、MIP-2、MCP-1mRNA水平和蛋白水平的變化。
　　(

3、2)應用western blot方法檢測1、2、4、6、8、12h ERK1/2, p38MAPK,JNK,ATF-2,c-jun磷酸化及總蛋白表達變化。
　　(3)將ERK1/2, JNK,p38MAPK通路抑制劑U0126, SP600125, and SB203580單獨或兩兩混合預先加入LPS干預的A549細胞中,應用熒光實時定量PCR檢測1、6、12h MIP-2 mRNA表達的變化。
　　結果:
　　(1)