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文檔簡介
1、目的:探討跨膜糖蛋白podoplanin在人早孕期母胎界面的表達及其對蛻膜基質細胞增殖及侵襲等生物學功能的影響。
方法:收集正常早孕期蛻膜及絨毛組織,應用本實驗室建立的胰酶消化、密度梯度離心法分離和培養(yǎng)蛻膜基質細胞(decidual stromal cells,DSCs)和滋養(yǎng)細胞(trophoblasts,Tros)。采用免疫組織化學、免疫細胞化學以及流式細胞術分別檢測podoplanin和及其受體C型凝集素樣受體-2(
2、C-type lectin-like receptor-2,CLEC-2)的表達水平和特點;并以siRNA干擾技術沉默蛻膜基質細胞podoplanin的表達,然后采用MTT比色法檢測其活力、BrdU細胞增殖ELISA法檢測其增殖能力、以流式細胞術分析其凋亡情況以及Transwell法分析podoplanin沉默后細胞侵襲能力的改變。
結果:正常早孕蛻膜基質細胞和滋養(yǎng)細胞均表達podoplanin和CLEC-2,podopl
3、anin在DSCs的表達水平顯著高于Tros者,而CLEC-2在Tros和DSCs中表達水平均較低;采用siRNA干擾podoplanin在DSCs的表達后,在顯著降低細胞活力并抑制細胞增殖和侵襲能力的同時,促進了該細胞的凋亡。
結論:人早孕期母-胎界面均表達podoplanin及其受體CLEC-2,且podoplanin在蛻膜基質細胞的表達水平較高,提示podoplanin可能通過與內源性受體CLEC-2的相互作用參與調
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