GX-50抗皮膚衰老的研究.pdf

1、本實驗室前期研究表明,源自花椒的天然活性物質GX‐50對于NF‐κB途徑有抑制作用,根據文獻報道,NF‐κB途徑的抑制可以逆轉皮膚衰老的發(fā)生,因此我們對GX‐50是否具有抗皮膚衰老的作用進行了探究。本實驗室前期研究采用20月齡高齡小鼠建立自然衰老模型,在小鼠背部涂藥,以小鼠脊柱為對稱軸,左側涂抹GX‐50,右側涂抹等量的PBS作為對照,應用蘇木精‐伊紅(HE)染色和免疫組化的方法對GX‐50的作用進行組織學觀測,并采用Image J軟件

2、對皮膚組織免疫組化切片中膠原蛋白含量變化進行分析,實驗結果提示GX‐50在組織水平可能具有有效保護小鼠皮膚、一定程度地逆轉高齡小鼠皮膚衰老的發(fā)生、增加高齡小鼠皮膚膠原蛋白的表達的作用。
　　在組織水平,本研究采用Western blot對上述涂藥小鼠實驗組和對照組皮膚組織膠原蛋白含量的變化進行檢測。在細胞水平,以體外原代培養(yǎng)的人皮膚成纖維細胞為研究對象,用過氧化氫處理細胞建立人工衰老模型。采用β‐半乳糖苷酶染色法,細胞分泌物丙二醛

3、(MDA)變化的檢測和細胞胞內活性氧(ROS)含量變化的測定研究GX‐50抗皮膚細胞衰老的作用。采用Draize兔眼刺激性實驗對GX‐50的刺激性進行評價。Western blot實驗結果顯示,GX‐50在組織水平可以在一定程度上有效地增加膠原蛋白的表達。在細胞水平,β‐半乳糖苷酶染色實驗結果顯示:GX‐50預處理后過氧化氫處理組人皮膚成纖維細胞β‐半乳糖苷酶染色陽性率明顯低于過氧化氫單獨處理組; MDA檢測結果顯示:GX‐50處理組比

4、空白組MDA分泌量下降30.45％,GX‐50預處理后過氧化氫處理組比過氧化氫單獨處理組MDA分泌量下降61.46%;人皮膚成纖維細胞胞內ROS熒光檢測顯示:GX‐50處理組比對照組熒光值下降8.03%,GX‐50預處理后過氧化氫處理組比過氧化氫單獨處理組熒光值下降8.36%。根據Draize兔眼刺激性實驗評價標準:GX‐50各項刺激性均為零,表明對兔眼無刺激。綜上所述,GX‐50可以一定程度保護皮膚并逆轉皮膚衰老的發(fā)生,且根據經典的D