Cyclin E的表達與細胞凋亡關(guān)系的闡述.pdf

1、第一部分：cyclin E的表達對細胞凋亡的影響 目的：細胞周期與細胞凋亡是細胞最主要的生命活動。細胞周期決定著細胞的生長、分裂和復制。細胞凋亡決定著細胞的衰老、死亡和清除。兩者共同作用維持機體的穩(wěn)定性。Cyclin E在G1期合成，在G1進入S期時達到高峰，進入S期后逐漸降解消失，在G1期向S期轉(zhuǎn)變過程中起決定性作用。本部分研究主要觀察不同cyclin E表達的細胞周期狀態(tài)下，細胞凋亡發(fā)生的一般規(guī)律。 方法：我們以宮頸

2、癌細胞（Hela細胞）利用SiRNA技術(shù)建立不同cyclin E表達模型，觀察不同cyclin E表達下（高表達，低表達）的誘導凋亡率（以mimosine誘導）。 結(jié)果：cyclin E表達高的細胞組，其經(jīng)誘導凋亡率高于cyclin E表達低的細胞組；當細胞cyclin E表達低，細胞增殖減少時，細胞凋亡率也隨之下降。 結(jié)論：細胞凋亡明顯受細胞周期狀態(tài)的調(diào)節(jié)：細胞凋亡的發(fā)生需要細胞進入細胞周期。Cyclin E 可能是兩

3、者間的一個連接渠道。 第二部分：Cyclin E 在細胞凋亡發(fā)生中的表達分析 目的：以紫外線（UV）誘導Molt-4細胞凋亡建立模型，檢測凋亡細胞中cyclin E表達情況，進一步探討cyclin E在細胞周期特異性凋亡中的作用。 方法：收獲紫外線照射后的人類急性淋巴細胞性白血病細胞（MOLT-4），一部分采用流式細胞術(shù)凋亡誘導后的細胞進行cyclin E/DNA雙參數(shù)分析和API雙參數(shù)分析；一部分利用流式細胞分

4、選術(shù)將凋亡誘導后的細胞分為凋亡組和未凋亡組，Western Blot檢測并比較兩組細胞cyclin E蛋白表達情況。 結(jié)果：紫外線誘導的MOLT-4細胞凋亡具有周期特異性，主要表現(xiàn)為G1凋亡。在cyclin E/DNA雙參數(shù)分析觀察到凋亡誘導后細胞周期阻滯過程中cyclin E表達水平明顯升高。分選后western blot檢測觀察到凋亡組cyclin E表達明顯較未凋亡組低。 結(jié)論：cyclin E的降解過程可能參與了