滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中Cyclin E及其相關(guān)蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、目的： 探討CyclinE、CDK-2、P27KIP1以及P21WAF1/CIP1在正常胎盤組織、葡萄胎和滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤組織中的表達(dá)，研究上述指標(biāo)表達(dá)水平的相關(guān)性以及與妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的關(guān)系；觀察藥物全反式維甲酸對(duì)人絨毛膜癌細(xì)胞系JEG-3細(xì)胞的增殖以及上述細(xì)胞周期調(diào)控因子mRNA表達(dá)的影響。 方法： 采用鏈霉素—過(guò)氧化物酶(即S-P法)免疫組化方法檢測(cè)30例正常胎盤組織、38例葡萄胎組織和9例滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤組織(侵

2、蝕性葡萄胎8例，絨癌1例)中CyclinE、CDK-2、P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表達(dá)；不同濃度ATRA作用于人絨毛膜癌JEG-3細(xì)胞，采用MTT方法檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用；利用RT-PCR方法檢測(cè)藥物作用前后細(xì)胞中CyclinE、CDK-2、P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA表達(dá)的改變。 結(jié)果： 1.CyclinE、CDK-2在葡萄胎和滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤組織中的表達(dá)明顯高于正常胎盤組織(P

3、<0.05)，CyclinE、CDK-2在滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤與葡萄胎組織以及惡性轉(zhuǎn)變與未惡變的葡萄胎組織中的表達(dá)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；P27KIP1和P21WAF1/CIP1在滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)顯著低于葡萄胎和正常胎盤組織(P<0.05)，P27KIP1和P21WAF1/CIP1在發(fā)生惡性轉(zhuǎn)變的葡萄胎組織中的表達(dá)顯著低于未發(fā)生惡變者(P<0.05)。 2.對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中上述四種蛋白的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)進(jìn)行Spearman等級(jí)相關(guān)

4、性統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示，CyclinE高表達(dá)與P27KIP1和P21WAF1/CIP1的低表達(dá)呈負(fù)相關(guān)；CyclinE與CDK-2的高表達(dá)呈正相關(guān)；P27KIP1和P21WAF1/CIP1的低表達(dá)呈正相關(guān)，各組相關(guān)性比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。CDK-2表達(dá)隨P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表達(dá)降低呈增高趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3.以血β-HCG值100000mIU/ml為界將葡萄胎患者分為兩組，在

5、血β-HCG≥100000mIU/ml患者中，CyclinE和CDK-2表達(dá)呈增高趨勢(shì)；P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表達(dá)呈減低趨勢(shì)，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 4.以40歲為界將葡萄胎組患者分為兩組，CyclinE和CDK-2的表達(dá)在年齡大于40歲的葡萄胎患者中的表達(dá)呈增高趨勢(shì)，P27KIp1、P21WAF1/CIP1表達(dá)呈減低趨勢(shì)，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 5.ATRA能夠有效抑制人絨毛

6、膜癌細(xì)胞系JEG-3細(xì)胞的增殖，且其對(duì)JEG-3細(xì)胞的增殖抑制作用在一定范圍內(nèi)呈藥物濃度和時(shí)間依賴性。 6.ATRA作用于絨癌細(xì)胞系JEG-3細(xì)胞后，CyclinEmRNA的表達(dá)明顯下降(P<0.05)；P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA的表達(dá)則顯著升高(P<0.05)；CyclinE的表達(dá)下調(diào)以及P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA的表達(dá)上調(diào)均具有藥物濃度依賴性，即隨藥物濃度升高，CyclinE下調(diào)以

7、及P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA的表達(dá)上調(diào)越明顯，上述三個(gè)指標(biāo)的改變?cè)贏TRA各濃度組與對(duì)照組之間以及各濃度組兩兩之間比較，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。CDK-2mRNA的表達(dá)在藥物作用前后無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的改變(P>0.05)。 結(jié)論： 1.CyclinE/CDK-2復(fù)合物及其抑制蛋白P27KIP1和P21WAF1/CIP1的異常表達(dá)參與了滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的發(fā)生發(fā)展； 2.P27KIP1和P

8、21WAF1/CIP1有可能成為預(yù)測(cè)葡萄胎惡變的有效標(biāo)記物。 3.CyclinE、CDK-2、P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表達(dá)水平與葡萄胎患者的年齡及清宮術(shù)前血β-HCG水平均無(wú)關(guān)。 4.ATRA可通過(guò)下調(diào)CyclinEmRNA的表達(dá)、上調(diào)P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA的表達(dá)有效抑制人絨毛膜癌JEG-3細(xì)胞的增殖，且在一定范圍呈藥物濃度依賴性。因此，細(xì)胞周期蛋白E及其相關(guān)蛋白有可能為滋養(yǎng)細(xì)