陳皮多甲氧基黃酮有效部位研究.pdf

1、陳皮為蕓香科柑桔屬植物橘(CitrusreticulateBlanco)及其栽培變種的干燥成熟果皮。性溫，味辛、苦，歸脾、肺經，屬于理氣藥。具有理氣調中、化痰燥濕的功效。 近年來，國內外對陳皮中多甲氧基黃酮類成分的抗癌活性報道越來越多，提示這類成分具有潛在的抗癌作用，具有新藥開發(fā)價值。 因此，本論文對陳皮中多甲氧基黃酮有效部位進行了研究，共分為九章。 第一章對柑桔屬植物中多甲氧基黃酮類成分及其藥理活性進行了綜述，

2、并對中藥滴丸的制備工藝進行了總結，共引用文獻53篇。 第二章對陳皮多甲氧基黃酮有效部位進行了化學成分研究，分離得到了5個化合物，鑒定了其中4個，其中有三個為多甲氧基黃酮分別為：川陳皮素(nobiletin，5，6，7，8，3’，4’-六甲氧基黃酮)，3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黃酮，Natsudaidai(3-羥基，5，6，7，8，3’，4’-六甲氧基黃酮)，一個為β-谷甾醇(β-sitosterol)。 第

3、三章陳皮中多甲氧基黃酮有效部位的制備工藝研究首先優(yōu)選了多甲氧基黃酮有效部位的提取工藝。以川陳皮素、3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黃酮、Natsudaidai，的轉移率為檢測指標，對陳皮的提取工藝進行了考察，經數(shù)據(jù)分析，得出最佳提取工藝為：A2％乙醇，B2倍量，提取C2次，每次D2小時。 其次考察了陳皮中多甲氧基黃酮有效部位的純化富集工藝。最終確定用乙酸乙酯對陳皮提取物萃取2次后，用硅膠吸附、裝柱，以混合溶劑石油醚和乙酸

4、乙酯(E1：F1)洗脫5BV，洗去雜質；再用混合溶劑石油醚和乙酸乙酯(G2：H2)洗脫6BV，洗下有效部位。 第四章多甲氧基黃酮有效部位的質量標準研究1采用紫外法測定有效部位中多甲氧基黃酮的含量。以川陳皮素(nobiletin)為對照品，檢測波長333nm，所得線性方程為：y=64.459x+0.0092r=0.9996(n=5)。表明川陳皮素(nobiletin)在333nm檢測波長下，濃度在0.001635～0.01475m

5、g/ml之間與吸光度成良好線性關系。有效部位中多甲氧基黃酮含量為50％左右，加樣回收率為97.95％，RSD=2.69％(n=5)。 2采用高效液相法對有效部位中川陳皮素(nobiletin)、3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黃酮、Natsudaidai進行了含量測定。川陳皮素(nobiletin)標準曲線為y=3343.4x-1.3383r=0.9999(n=5)，表明川陳皮素在0.0654～0.654ug范圍內質量與

6、峰面積成線性關系。經測定有效部位中川陳皮素(nobiletin)含量為11.5％，加樣回收率為96.71％，RSD=1.19％(n=5)。七甲氧基黃酮標準曲線為y=3306.8x+0.1049r=0.9999(n=5)表明3,5,6,7,8,3’，4’-七甲氧基黃酮在0.0732～0.732ug范圍內質量與峰面積成線性關系。經測定有效部位中3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黃酮含量為20％，加樣回收率為97.8％，RSD=1.85

7、％(n=5)。Natsudaidai標準曲線為y=2584.1x-21.957r=0.9999(n=6)表明Natsudadai在0.07～0.875ug范圍內質量與峰面積成線性關系。經測定有效部位中Natsudaidai含量為8.22％，加樣回收率為98.52％，RSD=2.1％(n=5)。有效部位中所測三種多甲氧基黃酮總含量為40％左右，川陳皮素(nobiletin)，3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黃酮，Natsudaid

8、ai三種成分含量之比為7：12：5。并且通過測定檢測波長下三種對照品的響應值確定了僅以3,5,6,7,8,3’，4’-七甲氧基黃酮為對照測定三種多甲氧基黃酮的計算公式，方便了測定。 第五章有效部位的指紋圖譜的建立用HPLC法建立了陳皮多甲氧基黃酮有效部位的指紋圖譜，通過考察七批有效部位指紋圖譜，建立了有效部位的對照指紋圖譜。 第六章多甲氧基黃酮有效部位及七甲氧基黃酮單體體內外抗腫瘤藥理實驗第一部分為多甲氧基黃酮有效部位及

9、七甲氧基黃酮單體體外MTT實驗。本實驗用MTT法觀察了多甲氧基黃酮有效部位及七甲氧基黃酮單體在不同濃度下對人肝癌細胞株Bel-7402、人結腸癌細胞株HCT-116、人胃癌細胞株BGC-823、人膀胱癌細胞株EJ、人食管癌細胞株CaEs-17的殺傷作用。發(fā)現(xiàn)有效部位的活性優(yōu)于單體的活性。 第二部分為體內藥理實驗。以小鼠皮下移植S180肉瘤為動物模型，用陳皮提取物灌胃給藥，結果表明陳皮粗提物對小鼠移植性腫瘤的生長有抑制趨勢，但無統(tǒng)