2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩93頁(yè)未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、第一部分馬齒莧總黃酮的提取和其含量及相關(guān)成分染料木苷含量的測(cè)定
   【目的】:
   在前期研究的基礎(chǔ)上,本實(shí)驗(yàn)主要提取和制備馬齒莧黃酮有效部位,同時(shí)利用高效液相鑒定馬齒莧黃酮的相關(guān)成分,用RP-HPLC對(duì)相關(guān)成分的含量進(jìn)行測(cè)定。
   【方法】:
   每公斤馬齒莧全草用含3%(g/ml)氫氧化鈉和60%(ml/ml)乙醇?jí)A性醇液煎煮三次,時(shí)間分別為2 h、1h、0.5h,收集三次提取液,蒸發(fā)其中的乙

2、醇至無(wú)醇味。
   將濃縮提取液上1m×10cm的聚酰胺柱,柱高40cm,吸咐2h, 倒掉濾液,再用雙蒸水反復(fù)洗脫至洗脫液無(wú)色為止,棄此洗脫液;最后用95%(ml/ml)乙醇洗脫,至洗脫液為淡黃色時(shí)停止,收集此洗脫液,進(jìn)一步用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)得含生藥6 kg.L-1的馬齒莧黃酮提取液。
   利用黃酮與亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉形成絡(luò)合物,用分光光度計(jì)在510nm可見(jiàn)光處測(cè)定其吸收度,進(jìn)行總黃酮含量的測(cè)定。用RP-HPLC

3、鑒定馬齒莧黃酮的相關(guān)成分并進(jìn)行含量測(cè)定。
   【結(jié)果】:
   馬齒莧總黃酮的含量占其全草總重量的7.67%,該產(chǎn)品可用于制備胰島素增敏劑。馬齒莧黃酮部位中染料木苷與標(biāo)準(zhǔn)品中染料木苷保留時(shí)間一致,染料木苷在6.25 μg.L-1~200.00μg.L-1線性關(guān)系良好,r=0.9999。含生藥6 kg.L-1的馬齒莧黃酮提取液中染料木苷含量為1.68mg.L-1。
   【結(jié)論】:
   馬齒莧全草中含7

4、.67%黃酮,染料木苷為本總黃酮的相關(guān)成分,含生藥6 kg.L-1的馬齒莧黃酮提取液中染料木苷含量為1.68mg.L-1。
   第二部分染料木苷改善HepG2細(xì)胞中FFAs誘導(dǎo)的胰島素抵抗
   【目的】:
   在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,本實(shí)驗(yàn)采用軟脂酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗,同時(shí)觀察染料木苷對(duì)HepG2胰島素抵抗細(xì)胞培養(yǎng)基中葡萄糖消耗的影響以及染料木苷影響葡萄糖消耗的初步機(jī)理。
   【方法】:

5、
   體外培養(yǎng)HepG2細(xì)胞,用0.5mmol/L軟脂酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞造胰島素抵抗模型,同時(shí)使用不同濃度的染料木苷(1、2、4μmol/L)以及作為陽(yáng)性對(duì)照的羅格列酮(1μmol/L)干預(yù)24 h,用MTT法檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響,用葡萄糖氧化酶法測(cè)定培養(yǎng)基中葡萄糖的含量,用免疫印跡的方法測(cè)定葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)的表達(dá)水平。
   【結(jié)果】:
   與正常對(duì)照組比較,1-4μmol/L的染料

6、木苷對(duì)HepG2細(xì)胞增殖的影響無(wú)明顯差異(P>0.05),葡萄糖消耗量隨著染料木苷的濃度增加而明顯提高,各組與模型組比較差異明顯(P<0.05 or P<0.01),葡萄糖消耗量最大增多0.35mM;治療各組中HepG2細(xì)胞GLUT1蛋白表達(dá)水平與模型組比較明顯增強(qiáng)。
   【結(jié)論】:
   染料木苷能改善軟脂酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的胰島素抵抗,作用隨劑量增加而增強(qiáng)。
   第三部分
   染料木素通過(guò)抑制

7、JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路改善HepG2細(xì)胞中胰島素抵抗的實(shí)驗(yàn)研究【目的】:
   本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)研究染料木素對(duì)HepG2細(xì)胞胰島素抵抗的改善作用。通過(guò)觀察各組HepG2細(xì)胞培養(yǎng)基中葡萄糖含量在用藥前后的變化,測(cè)定J NK信號(hào)通路各級(jí)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白的表達(dá)情況,對(duì)染料木素逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗的作用和分子機(jī)理做進(jìn)一步的研究。
   【方法】:
   模型組用含0.5 mmol/L PA/0.2% BSA無(wú)血清的高糖(22.2mmol/L

8、)DMEM培養(yǎng)HepG2細(xì)胞,建立HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型;正常組用含或不含1nmol/L胰島素、0.2% BSA無(wú)血清的高糖(22.2mmol/L)DMEM培養(yǎng)HepG2細(xì)胞;模型組用含或不含1nmol/L胰島素造模液造模;陽(yáng)性對(duì)照組用含或不含1nmol/L胰島素造模液培養(yǎng),同時(shí)加入1μmol/L羅格列酮干預(yù);不同劑量染料木素組用含或不含1nmol/L胰島素造模液培養(yǎng),分別同時(shí)加入1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L染料

9、木素。干預(yù)24小時(shí)后,取出各組培養(yǎng)液用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)葡萄糖含量。用MTT法檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響,用免疫印跡的方法測(cè)定JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中T-JNK、P-JNK、IRS-1、IRS-1Ser307、PI-3K p85、GLUT1的蛋白的表達(dá)。
   【結(jié)果】:
   與正常組比較,含胰島素的模型組葡萄糖消耗明顯降低(P<0.01);與模型組比較,含胰島素的羅格列酮組和不同劑量染料木素組葡萄糖消耗明顯增加(P<0

10、.05 or 0.01),無(wú)胰島素各組葡萄糖消耗無(wú)明顯區(qū)別。免疫印跡結(jié)果表明,與正常組比較,模型組中T-JNK、P-JNK、IRS-1Ser307蛋白表達(dá)顯著增加,IRS-1、PI-3K p85、GLUT1表達(dá)明顯減少;與模型組比較羅格列酮組和不同劑量染料木素組中T-JNK、P-JNK、IRS-1Ser307蛋白表達(dá)顯著減少,IRS-1、PI-3K p85、GLUT1表達(dá)明顯增加。
   【結(jié)論】:
   染料木素與羅格

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論