馬齒莧提取物治療急性濕疹的藥效研究及作用機(jī)理實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀(guān)察馬齒莧提取物對(duì)濕疹大鼠皮膚的治療效果，探討單品馬齒莧的藥效以及促進(jìn)濕疹病變部位修復(fù)的作用機(jī)理。
　　方法：
　　1.SD大鼠70只，按體重隨機(jī)分為7個(gè)組，每組10只，分別作為正常組、模型組、Caspase-14基因敲除組、陽(yáng)性組、馬齒莧提取物高、中、低劑量組。除正常組外，用電推剪及電剃須刀去除腹部毛發(fā),面積約2cm×3cm,并涂5％的2，4-二硝基氯苯（DNCB）30μl于皮膚首次致敏;第5天,在右背部2cm×2c

2、m剃毛區(qū)涂0.2%DNCB50μl進(jìn)行二次抗原攻擊,左背部對(duì)稱(chēng)的剃毛區(qū)不用藥物作為對(duì)照部位。以后每隔3d激發(fā)1次，連續(xù)3次。于第9天觀(guān)察大鼠右背部較左背部明顯出現(xiàn)紅斑，水腫，丘疹，糜爛或滲出，表明造模成功。實(shí)驗(yàn)第21天斷頸處死，剪取造模皮膚，用分析天平稱(chēng)重測(cè)量濕疹大鼠皮膚腫脹度；QRT-PCR檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組大鼠皮膚Caspase-14和Filaggrin基因表達(dá)；免疫組化檢測(cè)TNF-α、IL-22、IL-4、IFN-γ積分光密度。

3、　　2.另取大鼠50只，隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組，馬齒莧低劑量組、中劑量組、高劑量組。各組按規(guī)定的劑量外用給藥。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日，用0號(hào)砂紙擦傷大鼠剃毛處，局部再涂各組相應(yīng)藥物1次，末次涂藥后10min，開(kāi)始于創(chuàng)面處滴0.01%磷酸組胺每只0.05mL，此后每隔3min依0.01%，0.02%，0.03%，0.04%…濃度遞增，每一濃度滴加后觀(guān)察3min內(nèi)大鼠是否回頭舔右后足背，按此時(shí)磷酸組胺總量計(jì)算各組大鼠的致癢閡。
　　結(jié)

4、果：
　　1.與空白對(duì)照組相比，高劑量組小鼠皮膚腫脹度明顯小于空白對(duì)照組（P<0.01)，中劑量組、陽(yáng)性藥物組小鼠皮膚腫脹度也小于模型組(P<0.05)。
　　2.與正常組比較，模型組和Caspase-14基因敲除組大鼠皮膚組織細(xì)胞中Caspase-14和 Filaggrin基因的2-△△CT值極顯著減小(P<0.01)，與模型組和Caspase-14基因敲除組比較，馬齒莧三個(gè)劑量組大鼠皮膚組織細(xì)胞中Caspase-14和F

5、ilaggrin基因的2-△△CT值極顯著增大(P<0.01)。
　　3.與正常組比較，模型組大鼠皮膚組織TNF-α免疫組織化學(xué)檢測(cè)積分光密度（IOD）極顯著增大（P<0.01）；模型組大鼠皮膚組織IL-22免疫組織化學(xué)檢測(cè)積分光密度（IOD）極顯著增大（P<0.01）；模型組大鼠皮膚組織IL-4免疫組織化學(xué)檢測(cè)積分光密度（IOD）極顯著增大（P<0.01）；模型組大鼠皮膚組織 IFN-γ免疫組織化學(xué)檢測(cè)積分光密度（IOD）顯著減

6、?。≒<0.05）。
　　4.磷酸組胺對(duì)不同劑量組的致癢閾記錄顯示，馬齒莧提取物中劑量組的致癢閾高于陽(yáng)性對(duì)照組（P<0.05），高劑量組明顯高于陽(yáng)性對(duì)照組（P<0.05）。
　　結(jié)論：馬齒莧提取物可以使血管收縮，抑制毛細(xì)血管通透性，抑制炎性腫脹，從而減輕濕疹局部的瘙癢、水腫癥狀。馬齒莧提取物還可顯著上調(diào)濕疹動(dòng)物皮膚屏障系統(tǒng)中Caspase-14和Filaggrin基因的表達(dá)，提示馬齒莧通過(guò)促進(jìn)Caspase-14基因的表達(dá)而