馬齒莧提取物抗缺氧作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)的增大和生活節(jié)奏的加快使得現(xiàn)代人承擔(dān)的壓力越來(lái)越大，腦力工作的負(fù)擔(dān)也不斷增加，需更多的血液和氧氣才能保證大腦的順暢工作。當(dāng)進(jìn)行高空、潛水等作業(yè)或患某些疾病時(shí)，同樣會(huì)遇到各種情況的缺氧。缺氧可引起機(jī)體一系列生理代償反應(yīng)，如心率增加，血流動(dòng)力學(xué)改變，肺動(dòng)脈高壓、能量代謝障礙等，尤其是其可致心肌受損、腦功能下降。因此采用一些抗缺氧的藥物改善機(jī)體供氧和能量狀態(tài)，對(duì)提高機(jī)體在缺氧條件下的生活質(zhì)量和活動(dòng)能力有非常重要的意義。研究表明部分西藥

2、對(duì)缺氧引起的癥狀具有一定的緩解作用，但由于這些藥物的副作用很大，導(dǎo)致其實(shí)際使用受到很大限制。另根據(jù)報(bào)道，人參、紅景天、銀杏提取物等中藥具有提高機(jī)體缺氧耐受作用，但它們大多數(shù)都屬于貴重中藥或藏藥，分布局限，資源很少而且價(jià)格昂貴，因此也難以在大范圍內(nèi)推廣使用。
　　 馬齒莧(Portulaca oleracea L.)為馬齒莧科馬齒莧屬植物，又名馬齒草、五行草、長(zhǎng)命菜、九頭獅子草、酸味菜、螞蟻菜等，我國(guó)南北各地均產(chǎn)，廣布全世界溫帶和

3、熱帶地區(qū)，為藥食兩用植物。據(jù)《本草綱目》記載，臨床可用于“散血消腫，利腸滑胎，解毒通淋，治產(chǎn)后虛汗”。馬齒莧含有豐富的脂肪酸、揮發(fā)油、多糖、氨基酸、和礦物質(zhì)等多種具有藥用價(jià)值的化學(xué)成分，這使得馬齒莧的開(kāi)發(fā)具有很好的物質(zhì)基礎(chǔ)。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)馬齒莧水提物能夠明顯延長(zhǎng)小鼠在密閉缺氧環(huán)境中的生存時(shí)間和氰化鉀中毒后的生存時(shí)間，提高缺氧小鼠的無(wú)氧酵解關(guān)鍵酶丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶的活性和組織細(xì)胞ATP水平，馬齒莧還能夠促進(jìn)缺氧小鼠大腦皮層HIF

4、-1α表達(dá)。但是馬齒莧水提物的成分非常復(fù)雜，一些無(wú)效的雜質(zhì)含量太高這給后期的開(kāi)發(fā)研究工作帶來(lái)很大的困難。為了進(jìn)一步分離出馬齒莧抗缺氧的有效活性部位，并且根據(jù)中藥篩選活性成分的程序觀察其體內(nèi)外抗缺氧效果，探索其抗缺氧成分具體的作用機(jī)制，我們進(jìn)行了如下的研究。
　　 目的:進(jìn)一步篩選馬齒莧抗缺氧作用的主要活性部位，并通過(guò)體內(nèi)與體外實(shí)驗(yàn)觀察馬齒莧提取物對(duì)缺氧小鼠/神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用，闡明馬齒莧提取物缺氧保護(hù)作用的藥理機(jī)制，為將藥食兩用

5、植物馬齒莧開(kāi)發(fā)成為功能因子明確的抗缺氧保健食品或藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.馬齒莧抗缺氧活性部位的篩選及量效關(guān)系研究
　　 1.1馬齒莧各提取部分制備；
　　 1.2常壓密閉缺氧暴露實(shí)驗(yàn)；
　　 1.3有效部位不同劑量常壓密閉缺氧暴露小鼠生存時(shí)間實(shí)驗(yàn)；
　　 1.4亞硝酸鈉中毒生存時(shí)間實(shí)驗(yàn)；
　　 1.5 GC-MS方法分析馬齒莧活性部位的化學(xué)成分。
　　

6、2.馬齒莧提取物對(duì)缺氧神經(jīng)保護(hù)作用研究
　　 2.1含藥血清的制備；
　　 2.2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)；
　　 2.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
　　 3.馬齒莧提取物缺氧神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制研究
　　 3.1細(xì)胞實(shí)驗(yàn)；
　　 3.2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
　　 4.數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與處理。
　　 結(jié)論:
　　 1.本研究通過(guò)進(jìn)一步對(duì)馬齒莧抗缺氧的活性部位進(jìn)行篩選，得到沉淀部位可以延長(zhǎng)常壓缺氧小鼠生存時(shí)間。而且馬齒

7、莧提取物不同劑量對(duì)常壓缺氧、亞硝酸鈉中毒小鼠生存時(shí)間的影響小鼠有延長(zhǎng)生存時(shí)間的作用，而且隨著劑量的增加，缺氧生存時(shí)間有所延長(zhǎng)，其抗缺氧的有效成分可能為萜類(lèi)以及有機(jī)酸類(lèi)等。
　　 2.體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，馬齒莧提取物可以緩解缺氧或氯化鈷刺激條對(duì)PC-12細(xì)胞、以及原代培養(yǎng)神經(jīng)元的損傷，提高細(xì)胞活性，減少細(xì)胞凋亡，降低細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的活性。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，馬齒莧提取物可以減輕缺氧小鼠腦組織損傷程度，降低病理學(xué)評(píng)分，降低缺氧小鼠大腦皮層