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文檔簡介
1、目的:通過檢測帕金森病模型大鼠行為變化以了解龜羚帕安丸對帕金森病大鼠癥狀的治療效果;通過研究龜羚帕安丸對帕金森病模型大鼠血清中SOD、MDA、T-AOC含量的影響,探討龜羚帕安丸治療帕金森病的可能作用機(jī)制,為臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。
方法:將大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,將無旋轉(zhuǎn)行為的大鼠作為實驗對象,隨機(jī)分為實驗組和假手術(shù)組。實驗組采用以下方法造模:①麻醉:使用水合氯醛給予腹腔注射麻醉;②大鼠腦立體定位儀定位:以嚴(yán)格顱平位定位;確定手術(shù)
2、部位,給予常規(guī)消毒、備皮;沿正中線切開頭皮、剝?nèi)ス悄ぁ⒈┞冻銮昂筘?,確定左側(cè)黑質(zhì)致密部位置,用牙科鉆小心緩慢鉆透顱骨,至預(yù)定位置。③微量進(jìn)樣器注射:按確定好的坐標(biāo)位置進(jìn)針,到達(dá)預(yù)定深度后注入8μg6-OHDA;留針30min;退針。用牙科膠覆蓋鉆孔,常規(guī)縫合傷口;④連續(xù)3天腹腔注射10萬u/kg青霉素以預(yù)防術(shù)后感染。(參照周厚廣等造模方法建立帕金森病大鼠模型)
假手術(shù)組大鼠注射含0.2g/L抗壞血酸的等量生理鹽水,其余條件與過
3、程與造模組完全相同。
實驗組、假手術(shù)組大鼠術(shù)后在相同條件下常規(guī)飼養(yǎng),術(shù)后第28天應(yīng)用阿樸嗎啡(Apomorphine,APO)為誘導(dǎo)劑進(jìn)行行為檢測,需注意觀察是否伴有頭偏斜、震顫、活動遲緩等異常行為。經(jīng)反復(fù)行為檢測,記錄觀測數(shù)據(jù),取平均值。
將造模成功的PD模型大鼠隨機(jī)區(qū)組分為模型對照組(簡稱模型組)、美多芭組和龜羚帕安丸大、中、小劑量組。美多芭組按26.04mg/kg/d給藥;龜羚帕安丸大劑量組按3.75g/kg/
4、d給藥;中劑量按1.87g/kg/d給藥;小劑量組按0.93g/kg/d給藥。假手術(shù)組、模型組在與藥物干預(yù)組相同的飼養(yǎng)條件下常規(guī)飼養(yǎng)。給藥1天2次,共30天。造模前3天、造模成功第28、29、30天、藥物干預(yù)后第28、29、30天分別連續(xù)多次分時間段觀察大鼠行為情況,進(jìn)行記錄。
末次喂養(yǎng)24h后,斷頭處死大鼠,取血2ml,注入試管中,分離血清。SOD活性測定用 WST法、MDA含量測定用 TBA法、T-AOC活性用 Fe3+還
5、原法,所有實驗操作步驟均由專人在河南省中醫(yī)院檢驗科,嚴(yán)格按說明書操作完成。
結(jié)果:(1)術(shù)后30天實驗組大鼠旋轉(zhuǎn)等行為變化與術(shù)前比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);
(2)藥物干預(yù)前與藥物干預(yù)后30天大鼠行為比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);
(3)美多芭組、龜羚帕安丸大劑量組、中劑量組、小劑量組 SOD活力與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);美多芭組、龜羚帕安丸大劑量組、中劑量組SOD活力與龜羚帕安丸
6、小劑量組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);
(4)美多芭組、龜羚帕安丸大劑量組與模型組MDA值比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);
(5)美多芭組、龜羚帕安丸大劑量組、中劑量組、小劑量組 T-AOC活性與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);美多芭組、龜羚帕安丸大劑量組 T-AOC活性與龜羚帕安丸中劑量組比較、小劑量組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
結(jié)論:龜羚帕安丸能夠改善PD模型大鼠的旋轉(zhuǎn)等異常行為;
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