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文檔簡介
1、目的:觀察龜羚帕安丸對(duì)帕金森病模型大鼠黑質(zhì)細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)蛋白 Bcl-2、Bax含量表達(dá)的影響,進(jìn)而從細(xì)胞凋亡的角度探究分析龜羚帕安丸治療帕金森病可能的途徑及靶點(diǎn),為研究龜羚帕安丸多層次、多角度的作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:本課題組利用立體定向技術(shù),采用6-羥基多巴胺(6-OHDA)誘導(dǎo)建立PD大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,用阿撲嗎啡(Apomorphine,APO)誘導(dǎo)大鼠行為學(xué)的改變判斷造模成功與否,選取造模成功的大鼠隨機(jī)分為5組:
2、龜羚帕安丸高劑量組(高劑量組)、龜羚帕安丸中劑量組(中劑量組)、龜羚帕安丸低劑量組(低劑量組)、美多芭組和龜羚帕安丸模型組(模型組),分別給予龜羚帕安丸高、中、低劑量中藥液、美多芭片藥液和生理鹽水灌胃治療;另外,建立假手術(shù)組作為對(duì)照,給予生理鹽水灌胃;每日2次,共灌胃30天。取材后采用TUNEL法觀察中腦黑質(zhì)細(xì)胞凋亡的變化,并用免疫組織化學(xué)技術(shù)測定黑質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白含量的表達(dá)及Bcl-2/Bax的比值。
結(jié)果:
3、1、各組SD大鼠造模后APO誘導(dǎo)結(jié)果:本研究SD大鼠造模成功率為42%。2、各組SD大鼠黑質(zhì)TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果:與模型組比較,高、中、低劑量組及美多芭組的凋亡百分率明顯低于模型組(P<0.05),并且模型組可見大量陽性細(xì)胞;與美多芭組比較,中、低劑量組凋亡百分率明顯高于美多芭組(P<0.05),高劑量組凋亡百分率略高于美多芭組,但之間比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);中藥高、中、低劑量組之間比較存在明顯差異性(P<0.05
4、),說明隨著劑量的增高對(duì)細(xì)胞凋亡的抑制越明顯。3、各組SD大鼠黑質(zhì)內(nèi)Bcl-2、Bax陽性細(xì)胞的表達(dá)及Bcl-2/Bax比值的結(jié)果:與假手術(shù)組對(duì)比,模型組大鼠黑質(zhì) Bcl-2、Bax陽性細(xì)胞數(shù)明顯升高(P<0.05),Bcl-2/Bax的比值明顯降低,(P<0.05);與模型組對(duì)比,高、中、低劑量組及美多芭組大鼠黑質(zhì)Bax陽性細(xì)胞數(shù)明顯降低(P<0.05),Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)及 Bcl-2/Bax的比值明顯升高(P<0.05);與美多
5、芭組對(duì)比,高劑量組的Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)略高(P>0.05),高劑量組的Bax陽性細(xì)胞數(shù)明顯低于美多芭組(P<0.05),高劑量組的Bcl-2/Bax比值明顯高于美多芭組(P<0.05);與中、低劑量組對(duì)比,高劑量組的Bax陽性細(xì)胞數(shù)降低,Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)及Bcl-2/Bax的比值顯著升高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:1、龜羚帕安丸具有保護(hù)PD模型大鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的作用。2、龜羚帕安丸通過提高Bc1-2
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