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文檔簡介
1、目的:本實驗通過建立大鼠尾狀核腦出血模型,并給予不同劑量的當(dāng)歸水煎液干預(yù),觀察不同劑量當(dāng)歸對神經(jīng)細胞凋亡的影響及可能的相關(guān)機制。
方法:
1.實驗分組:將60只Wistar大鼠隨機分為6組(每組10只):空白組、假手術(shù)組、模型組、當(dāng)歸低劑量組(2.8 g/k g)、當(dāng)歸中劑量組(5.4 g/k g)和當(dāng)歸高劑量組(10.8g/k g)。
2.腦出血大鼠模型建立及藥物干預(yù):采用Ⅳ型膠原酶/低分子肝素法注入大鼠
2、尾狀核造模??瞻捉M,不做任何處理;假手術(shù)組,僅開顱不注入藥物;模型組,Ⅳ膠原酶尾狀核注射造模;假手術(shù)組與模型組造模后每天蒸餾水灌胃1次,每次3 mL;不同劑量當(dāng)歸組(2.8g/k g、5.4 g/k g和10.8 g/k g)給予當(dāng)歸水煎液灌胃。
3.神經(jīng)功能障礙評分:參照 Del-Bigio[34]神經(jīng)行為學(xué)評分。
4.標本檢測:用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測Bax mRNA、Bcl-2 mRNA及C
3、aspase-3 mRNA的表達水平;免疫組化法檢測神經(jīng)細胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2及Caspase-3表達水平。
5.統(tǒng)計分析:采用SPSS17.0軟件對實驗結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析,各組數(shù)據(jù)之間的差異比較采用單因素方差分析法,P<0.05表明實驗結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義,所得結(jié)果以均數(shù)±標準差表示。
結(jié)果:
1.免疫組化法結(jié)果顯示:各分組經(jīng)不同劑量當(dāng)歸水煎液處理后腦出血大鼠周圍腦組織內(nèi)促凋亡相關(guān)蛋白Bax和C
4、aspase-3呈現(xiàn)劑量依賴性的下降,具有顯著性差異,而抑凋亡蛋白Bcl-2的表達呈現(xiàn)劑量依賴性的上升。
2.RT-PCR結(jié)果顯示:經(jīng)不同劑量當(dāng)歸水煎液處理后腦出血大鼠腦組織內(nèi)促凋亡相關(guān)蛋白Bax mRNA和Caspase-3 mRNA的表達呈現(xiàn)劑量依賴性的下降,而抑凋亡蛋白Bcl-2 mRNA的表達呈現(xiàn)劑量依賴性的上升。
結(jié)論:大劑量當(dāng)歸對腦出血大鼠神經(jīng)細胞的過度凋亡有調(diào)節(jié)作用,其中高、中劑量當(dāng)歸作用更為明顯,其發(fā)
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