腦出血后血腫周圍神經(jīng)細胞凋亡及其與Caspase-3表達關(guān)系的實驗研究.pdf

1、，I^墮些史亙墮壁旦旦塑絲塑墮塑生星基量￡!!￡!!!：!墨壟差墨盟塞墼盟壅——————————————i!曼摘要爭互59175目的：本實驗通過觀察腦出血后不同時期血腫周圍神經(jīng)細胞凋亡情況和Caspase3基因表達，來探討腦出血后血腫周圍神經(jīng)細胞損傷的機制，并探討Caspase3與腦出血后神經(jīng)細胞凋亡的關(guān)系。方法：在立體定向下采用二次注入法向成年大鼠右尾殼核區(qū)注射自體動脈血60ul制成大鼠腦內(nèi)血腫模型，用相同的方法注射等量的無活性石蠟油

2、作為對照組。于腦出血后4h、6h、1d、3d、5d、10d等不同時間點斷頭、取腦。采用原位未端標記法(TUNEL法)和免疫組化方法進行動態(tài)形態(tài)學觀察，了解出血后不同階段血腫周圍神經(jīng)亡和Caspase3蛋白表達情況。果：自體動脈血注入后，大鼠出現(xiàn)左側(cè)肢體偏癱、活動減少、向左側(cè)轉(zhuǎn)圈等行為學改變。大體標本觀察可見右尾殼核區(qū)大小、形態(tài)比較一致的血腫。腦出血后4h時血腫周圍尚無凋亡細胞出現(xiàn)。6h血腫周圍區(qū)即有凋亡的神經(jīng)細胞出現(xiàn)，逐漸增多，3天達高

3、峰之后逐漸下降，lo天仍可見凋亡細胞。在HE染色中病理改變明顯的部位凋亡細胞比較集中，無相應改變的部位也有凋亡細胞存在。腦出血后6小時血腫周圍神經(jīng)細胞Caspase3蛋白開始表達，3天達高峰以后逐漸恢復。注射石蠟油的對照組周圍腦組織僅有少量TUNEL陽性細胞及Caspase3蛋白陽性表達細胞，與假手術(shù)組無顯著性差異≯結(jié)論：①立體定向下二次注血法制作的大鼠腦出血模型具有操作簡單、重復性好、接近臨床的優(yōu)點。②腦出血后血腫周圍神經(jīng)細胞損傷有凋

4、亡機制參與，在出血后6小時發(fā)生凋亡，第3天達高峰，提示為減少血腫對周圍神經(jīng)細胞損害的程度，血腫清除的時間窗應在出血后6小時內(nèi)。③Caspase3表達時相變化與血腫周圍神經(jīng)細胞凋亡基本一致，Caspase3表達增加與血腫周圍神經(jīng)細胞凋亡有關(guān)。④首次證實，腦出血后周圍神經(jīng)細胞的損害在分子學水平其范圍遠比肉眼和病理所觀察到的要廣泛。＼／關(guān)鍵詞：腦出血捅亡Caspase3蛋白表達大鼠墮坐些巫壘壁旦里塑!絲塑墮塑圭墨苧量￡!!貯竺!：!壅墮差墨盟

5、壅絲墅蔓皇呈至!曼皇￡!werefoundintheparaffinoilcontrolbrainsTheCaspase一3proteinbegantoexpressat6hafterhemorrhage，peakedat3days，andthendeclinedgraduallyConclusion：①Themodelofintracerebralhemorrhageinratshastheadvantagesofeasyoperat

6、ion，goodrepetitionandetai②ApoptosisisapatternofneuronalcelldeathafterintracerebralhemorrhageTheapopticalneuronalcellsappearedat6h，andpeakedat3dafterhemorrhageanditdemonstratedthatthetimeofhematomaevacuationshouldbein6hou

7、rs③ThetimephasepatternofCaspase3proteinissimilartothatofneuronalapoptosisCaspase一3proteinplayanimportantroleintheprocessofapoptosisofneuronafterintracerebralhemorrhage④Theinjuryrangofneuronalcellssurroundingtheintracereb