警報素HMGB1在腦出血大鼠血腫周邊區(qū)的表達與神經(jīng)細胞凋亡的關(guān)系.pdf

1、目的：探討腦出血大鼠血腫周邊區(qū)HMGB1的表達與神經(jīng)細胞凋亡的關(guān)系。
　　方法：采用IV型膠原酶/低分子肝素法制作大鼠腦出血模型，96只健康雄性SD大鼠，體重200～250g,隨機分成假手術(shù)組和腦出血模型組，每組又分為術(shù)后6h，12h，24h，3d，5d，7d共7個時相點。在不同時間點觀察其行為學改變，評定方法包括：神經(jīng)功能缺損評分和運動功能評分（平衡木行走試驗、網(wǎng)屏試驗、轉(zhuǎn)棒試驗）。免疫組織化學方法檢測HMGB1蛋白的表達，RT

2、-PCR方法檢測HMGB1mRNA的表達，Elisa法檢測TNF-α、IL-6蛋白的表達及TUNEL法檢測神經(jīng)細胞凋亡，并對HMGB1的表達及與TNF-α、IL-6和神經(jīng)細胞凋亡的關(guān)系進行分析。
　　結(jié)果：1．神經(jīng)功能缺損評分：ICH24h時達到高峰，直至術(shù)后7d恢復到假手術(shù)組水平；運動功能評分（平衡木行走試驗、網(wǎng)屏試驗、轉(zhuǎn)棒試驗）：ICH后24h時達到高峰，然后逐漸下降，直至術(shù)后7d恢復到假手術(shù)組水平。神經(jīng)功能缺損評分和運動功能

3、評分與假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　2．假手術(shù)組未見HMGB1mRNA表達和蛋白陽性細胞，實驗組出現(xiàn)mRNA表達和大量棕黃色的HMGB1蛋白陽性細胞，于6h開始出現(xiàn)HMGB1mRNA表達和蛋白陽性細胞，24h達高峰，3d開始下降，5d再次升高，7d達到第二個高峰。實驗組HMGB1mRNA表達和IRS評分與假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　3．TNF-α、IL-6于腦出血后6h就達到表達高峰，隨

4、后逐漸下降，至7d接近假手術(shù)組水平。
　　4．凋亡檢測結(jié)果：TUNEL陽性細胞數(shù)在ICH24h達高峰，自3d開始逐漸下降，至7d仍維持在高水平，實驗組TUNEL陽性細胞數(shù)與假手術(shù)組有顯著性差異(P＜0.01)；ICH后24h與同一組內(nèi)其他時間點比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　5．大鼠腦出血后HMGB1蛋白的表達與神經(jīng)細胞凋亡呈顯著正相關(guān)(P＜0.01，r=0.32）。
　　結(jié)論：1．大鼠腦出血后HMGB1表達升