吡格列酮對(duì)大鼠腦出血后細(xì)胞凋亡因子表達(dá)的影響.pdf

1、摘要目的觀察過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體R ( p e r o x i s o m e p r o l i f e a t o r ．a(chǎn) c t i v a t e dr e c e p t o r Y ，P P A R r ) 激動(dòng)劑吡格列酮( p i o g l i t a z o n e ) 對(duì)大鼠腦出血后細(xì)胞色素c( C y t - c ) 、半胱天冬酶3 ( C a p a s e - 3 ) 表達(dá)的影響及其意義，探討吡格列酮對(duì)

2、大鼠腦出血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡通路的影響及可能的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。方法將6 4 只s D 大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組( S O 組) 、對(duì)照組( c o 組) 、吡格列酮干預(yù)組( P i o 組) 、5 羥基葵酸鹽( 5 - H D ) 與吡格列酮干預(yù)組( 5 - H D + P i o 組) ，每組8 只。應(yīng)用自體血尾狀核定位注射方法建立大鼠自體血腦出血模型。采用R T —P C R 和W e s t e r nB l o t 檢測(cè)大鼠血腫周圍組

3、織C y t —C 、C a s p a s e ～3 的表達(dá)情況。結(jié)果與s O 組比較，對(duì)照組、P i o 組、5 - H D + P i o 組C y t —C 、C a s p a s e 一3 明顯表達(dá)升高( F = 5 5 ．0 5 3 ，t = l O ．6 8 1 —1 1 ．4 9 2 ：F = 8 5 4 ．0 2 3 ，t = 3 1 ．6 3 8 —4 3 ．5 5 6 ：F = 5 2 ．0 9 0 ，t = 7

4、 ．2 2 0 —1 2 ．4 2 9 ：F = 1 3 0 ．4 7 4 ，t = 1 3 ．9 9 4 —1 9 ．2 1 1 ，PO ．0 5 ) 。結(jié)論吡格列酮可以減輕大鼠腦出血后C y t —c 、C a s p a s e 一3 的表達(dá)，而減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡。吡格列酮的神經(jīng)保護(hù)作用可被5 - H D 所對(duì)抗。碩士研究生李國(guó)迎( 神經(jīng)病學(xué))指導(dǎo)老師王海萍教授關(guān)鍵詞：腦出血：細(xì)胞凋亡：吡格列酮：細(xì)胞色素C ：半胱天冬酶3目錄引言?

5、????????????????????????????????1第一章實(shí)驗(yàn)材料???????????????????????????一21 ．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物??????????????????????????????21 ．2 實(shí)驗(yàn)器械及材料??????????????????????????·21 ．3 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑????????????????????????一21 ．4 P C R 引物設(shè)計(jì)合成?????????

6、????????????????·3第二章研究方法???????????????????????????一42 ．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組???????????????????????????一42 ．2 動(dòng)物模型制作及藥物干預(yù)方法????????????????????”42 ．2 ，1 腦出血模型制作????????????????????????52 ．2 ．2 神經(jīng)功能評(píng)分及藥物干預(yù)方法??????????????????62

7、 ．2 ．3 給藥方法???????????????????????????62 ．3 標(biāo)本取材?????????????????????????????- 62 ．4 R T —P C R 檢測(cè)大鼠腦組織中C y t —C 、C a s p a s e 一3m R N A 的表達(dá)????????··72 ．4 ．1 總R N A 的提取?????????????????????????72 ．4 。2 逆轉(zhuǎn)錄合成c

8、 D N A 第一鏈????????????????????一82 ．4 ．3 R T —P C R ?????????????????????????????????????????????··82 ．5 W e s t e r —b l o t 檢測(cè)大鼠腦組織中C y t —C 、C a s p a s e 一3 蛋白的表達(dá)???????82 ．5 ．1 腦組織總蛋白的提取????????????????????

9、??82 ．5 ．2 W e s t e r —b l o t 檢鋇9 C y t c 、C a s p a s e ～3 蛋白??????????????????????92 ．5 ．3 W e s t e r —b l o t 蛋白印記分析???????????????????92 ．6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理????????????????????????????·9第三章結(jié)果????????????????????????????