吡格列酮對糖尿病大鼠腎組織中TSP1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討噻唑烷二酮類藥物(TZDs)吡格列酮對1型糖尿病(T1DM)大鼠腎組織中血小板反應(yīng)蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)及轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表達(dá)的影響。
　　 方法：⑴分組及模型建立：40只健康、雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，體重205-250g,隨機分為4組：正常對照組(NC)；對照給藥組(NP)；模型組(D

2、M)；吡格列酮治療組(DP)。鏈脲佐菌素65mg·kg-1單次腹腔注射建立1型糖尿病動物模型，造模成功后DP和NP組給予吡格列酮20mg·kg-1·d-1 灌胃，對照組給予等劑量溶媒灌胃。每隔2周復(fù)測血糖。各組大鼠均給予足夠飼料和水喂養(yǎng)，觀察10周。
　　 ⑵相關(guān)指標(biāo)的檢測：10周末，代謝籠內(nèi)禁食收集24h尿標(biāo)本，檢測24h尿蛋白定量；麻醉后腹主動脈取血檢測肌酐水平；取雙腎去包膜稱重，計算腎臟肥大指數(shù)(左腎重·體重-1)。

3、>　　 ⑶免疫組化檢測：左腎置于4[％]多聚甲醛溶液中浸泡固定，用于制作病理切片并檢測腎組織中TSP-1和TGF-β1蛋白的表達(dá)。⑷RT-PCR法檢測：右腎組織迅速置于-80 ℃冰箱凍存，用于檢測腎組織TSP-1和TGF-β1mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：⑴各組生化指標(biāo)、腎臟肥大指數(shù)、24h尿蛋白的比較：與NC和NP組比較，DM和DP組BG、腎臟肥大指數(shù)、24h尿蛋白顯著升高(P<0.01);DP 與DM組比較，BG和Scr

4、略有不同，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；但腎臟肥大指數(shù)和尿蛋白明顯降低(P<0.05)。⑵腎組織P AS 染色病理改變：DM組顯示腎小球體積增大，系膜區(qū)陽性物質(zhì)明顯增多，系膜基質(zhì)呈中到重度增生，系膜區(qū)增寬；腎小管擴張，上皮細(xì)胞輕度水腫；間質(zhì)淋巴細(xì)胞灶狀浸潤，小動脈壁增厚。DP組系膜增生程度減輕，呈輕度；間質(zhì)少許淋巴細(xì)胞浸潤。⑶免疫組化：NC和NP組腎小球中偶見TSP-1的表達(dá)，DM和DP組TSP-1表達(dá)顯著增加(P<0.01)；與D

5、M組相比，DP組TSP-1陽性表達(dá)面積減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。NC和NP組腎小管間質(zhì)有少量TGF-β1表達(dá)，DM和DP組腎小球及小管間質(zhì)TGF-β1表達(dá)顯著增加(P<0.01)。與DM組相比，DP組TGF-β1表達(dá)明顯降低(P<0.05)。⑷RT-PCR :TSP-1和TGF-β1mRNA在NC及NP組表達(dá)較低；DM和DP組呈高水平表達(dá)，與NC組和NP組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。吡格列酮能降低腎組織中TSP