TTX對大鼠缺血心肌細胞凋亡及相關(guān)蛋白表達的影響.pdf

1、目的：研究河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)心臟停搏液對缺血再灌注大鼠心肌細胞凋亡及凋亡相關(guān)蛋白表達的影響。 方法：取Wistar大鼠24只，直接開胸取心，建立Langendorff-Neely離體心臟灌注模型，隨機分為3組(n=8)：基礎(chǔ)組、STH-2組和TTX組。基礎(chǔ)組持續(xù)用K-H液灌注60min后取左心室標本作為缺血前對照；STH-2組和TTX組為缺血再灌注實驗組，先用K-H液灌注60min，分別用STH-2和T

2、TX心臟停搏液灌注使心臟停搏并保存60min，然后恢復灌注60min，取左心室標本送檢。以上各組標本均采用TUNEL法檢測心肌細胞凋亡指數(shù)，免疫組織化學法測定心肌組織中凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2蛋白、Bax蛋白和p53蛋白的表達，Westem blot法定量檢測各組心肌組織中Bcl-2蛋白表達情況。 結(jié)果：與缺血前比較，缺血再灌注后心肌凋亡細胞數(shù)明顯增多，心肌細胞凋亡指數(shù)STH-2組(11.20±0.79％)和TTX組(6.92±1

3、.10％)均高于基礎(chǔ)組(1.34±0.23％，P<0.01)；再灌注后TTX組心肌細胞凋亡指數(shù)明顯低于STH-2組(P<0.01)。 免疫組織化學法檢測到心肌細胞中Bcl-2蛋白陽性表達指數(shù)分別為TTX組22.63±1.10％、STH-2組13.51±0.67％和基礎(chǔ)組2.52±0.58％，TTX組和STH-2組高于基礎(chǔ)組(P<0.01)，TTX組高于STH-2組(P<0.01)。Bax蛋白陽性表達指數(shù)分別為TTX組6.05±0

4、.46％、STH-2組8.04±0.57％和基礎(chǔ)組2.14±0.57％，TTX組和STH-2組高于基礎(chǔ)組(P<0.01)，TTX組低于STH-2組(P<0.01)。TTX組中Bcl-2/Bax為3.78±0.41，高于STH-2組的1.75±0.15和基礎(chǔ)組的1.19±0.08(P<0.01)。p53蛋白在各組均未見明顯陽性表達。 Westem blot法檢測到心肌細胞中Bcl-2蛋白的相對蛋白含量分別為TTX組86.1±0.98％、S