凋亡抑制蛋白XIAP對(duì)缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)的新生大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：采用凋亡抑制蛋白XIAP對(duì)缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡模型進(jìn)行干預(yù)，以探討脂質(zhì)體介導(dǎo)凋亡抑制基因XIAP轉(zhuǎn)染對(duì)缺氧.復(fù)氧誘導(dǎo)的新生大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響，為缺血性心臟病的治療探索一種新的基因治療方法。 方法：以SD大鼠的新生鼠(出生1～3天)心肌細(xì)胞為研究對(duì)象。按照Delyani的方法取材培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞，原代培養(yǎng)至第4天，將心肌細(xì)胞分為四組，1、XIAP組：將pDsRcd2-XIAP以脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染到心肌細(xì)胞48小時(shí)后進(jìn)行缺氧

2、(95％N2+5％CO2)2小時(shí)-復(fù)氧(5％CO2)1小時(shí)；2、預(yù)處理組：先將心肌細(xì)胞進(jìn)行缺氧預(yù)處理(缺氧10分鐘-復(fù)氧10分鐘，重復(fù)2次)，然后進(jìn)行缺氧2小時(shí)-復(fù)氧1小時(shí)；3、單純?nèi)毖?復(fù)氧組：將心肌細(xì)胞直接進(jìn)行缺氧2小時(shí)-復(fù)氧1小時(shí)；4、常氧組：將心肌細(xì)胞在CO2孵箱中培養(yǎng)3小時(shí)。各組最后用流式細(xì)胞儀Annexin v FITC檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率結(jié)果組間差異比較用單因素方差分析。 結(jié)果：1.pDsRed2-XIAP可以通過(guò)脂

3、質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方式轉(zhuǎn)染到心肌細(xì)胞；2.與單純?nèi)毖?復(fù)氧組比較，XIAP組和預(yù)處理組心肌細(xì)胞凋亡率明顯減低，P<0.01；3.XIAP組與預(yù)處理組比較二者心肌細(xì)胞凋亡率相似，P>0.05。 結(jié)論：以物理性的缺氧(95％N2+5％CO2)2小時(shí)-復(fù)氧(5％CO2)1小時(shí)的方式能誘導(dǎo)所培養(yǎng)的心肌細(xì)胞發(fā)生凋亡；凋亡抑制蛋白XIAP能明顯減少缺氧.復(fù)氧誘導(dǎo)新生大鼠心肌細(xì)胞的凋亡；凋亡抑制蛋白XIAP抑制凋亡的效應(yīng)與缺氧預(yù)處理抑制凋亡的效應(yīng)相似