S1P聯(lián)合大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞對(duì)新生大鼠心肌細(xì)胞缺氧-復(fù)氧損傷的影響.pdf

1、目的：
　　 探討1-磷酸神經(jīng)鞘氨醇(S1P)聯(lián)合大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞對(duì)新生大鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧后細(xì)胞損傷的影響。
　　 方法：
　　 1.分離新生1-3d的大鼠心室肌細(xì)胞、復(fù)蘇大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞株，分別行新生大鼠心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)(H組)、大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞培養(yǎng)(L6組)及兩種細(xì)胞共同培養(yǎng)(H+L6組)，通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)法，繪制不同時(shí)間段細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，以觀察各組細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
　　 2.在新生大鼠心

2、肌細(xì)胞A/R損傷模型中，通過(guò)對(duì)心肌細(xì)胞復(fù)氧4h后即時(shí)(R4h)、1 d及2d的噻唑藍(lán)(MTT)檢測(cè)，探索各時(shí)間段S1P對(duì)新生大鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧作用的最佳濃度。
　　 3.以最佳濃度SIP加入共同培養(yǎng)細(xì)胞(S+H+L6組)，分別對(duì)H+L6組、S+H+L6組實(shí)施缺氧2h/復(fù)氧4h干預(yù)，通過(guò)比較兩組吸光值(OD值)、乳酸脫氫酶(LDH)及丙二醛(MDA)等指標(biāo)在A/R各時(shí)間段差異，探討S1P聯(lián)合骨骼肌
　　 成肌細(xì)胞對(duì)新生

3、大鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧后細(xì)胞損傷的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1.細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果：新生大鼠心肌細(xì)胞在培養(yǎng)24h后開(kāi)始貼壁生長(zhǎng)，培養(yǎng)6d內(nèi)細(xì)胞數(shù)量未見(jiàn)明顯變化，培養(yǎng)2d后可見(jiàn)細(xì)胞搏動(dòng)；骨骼肌成肌細(xì)胞在培養(yǎng)6d內(nèi)細(xì)胞數(shù)增長(zhǎng)明顯，未見(jiàn)細(xì)胞搏動(dòng)；心肌細(xì)胞及骨骼肌成肌細(xì)胞在共同培養(yǎng)6d內(nèi)細(xì)胞總數(shù)增長(zhǎng)較快，可見(jiàn)部分搏動(dòng)細(xì)胞。
　　 2.S1P對(duì)心肌保護(hù)的有最佳濃度：在H組A/R損傷模型中，通過(guò)對(duì)活細(xì)胞數(shù)檢測(cè)顯示，與對(duì)照組相比(

4、H組中不加S1P)，實(shí)驗(yàn)組(H組中加S1P)S1P為1μM濃度時(shí)，均可明顯減少各時(shí)間段(R4h、1d、2d)A/R對(duì)心肌細(xì)胞的損傷(P<0.05)。
　　 3.S1P聯(lián)合骨骼肌成肌細(xì)胞對(duì)A/R大鼠心肌細(xì)胞保護(hù)作用：對(duì)H+L6組、S+H+L6組實(shí)施A2h/R4h干預(yù)后，分別檢測(cè)兩組R4h、1d、2d時(shí)的OD值、LDH和MDA，結(jié)果顯示：S+H+L6組(S1P1μM)的OD值明顯高于H+L6組(P<0.05)，LDH和MDA含量要明