胰高血糖素樣肽—1對缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)的心肌細胞損傷的影響.pdf

1、目的： 1．體外培養(yǎng)乳鼠心肌細胞。 2．研究胰高血糖素樣肽-1(glucagon-like peptide-1，GLP-1)對缺氧復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation，H/R)條件下心肌細胞損傷的作用，進一步驗證GLP-1是否具有心臟保護功能。 3．為GLP-1相關(guān)藥物的臨床應(yīng)用的安全性和有效性提供理論依據(jù)。 方法： 1．體外培養(yǎng)乳鼠心肌細胞，通過顯微鏡形態(tài)學(xué)觀察以及免疫組織化學(xué)方法鑒

2、定心肌細胞。 2．心肌細胞隨機分為三組：正常對照組(A組)，單純?nèi)毖?復(fù)氧組(缺氧16h，復(fù)氧4h，B組)，缺氧/復(fù)氧+GLP-1組(10nmol/L，C組)。 3．試劑盒測定各組培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)的活性。 4．碘化丙錠(propidium iodide，PI)單染后，以流式細胞儀檢測各組心肌細胞凋亡率。 5．試劑盒檢測各組半胱天冬酶3(caspase

3、-3)的活性。 結(jié)果： 1．經(jīng)各項鑒定培養(yǎng)細胞為心肌細胞，且純度可達90％。 2．LDH活性：與A組比較，B組的LDH活性明顯升高(210.0±11.5 U/L vs101.4±6.5U/L，P<0.01)，；與B組相比，C組的LDH活性降低(190.2±9.0 U/L vs 210.0±11.5 U/L，P<0.01)，二者差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。 3．細胞凋亡率：與A組比較，B組的細胞凋亡率顯著增高(8.

4、138±1.512vs0.575±0.167，P<0.01)；與B組比較，C組細胞凋亡率顯著降低(2.688±0.589 vs 8.138±1.512，P<0.01)，二者差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。 4．caspase-3活性：與A組比較，B組caspase-3活性明顯升高(445155.1±56914.2 vs 199813.1±19695.5，P<0.01)；與B組比較，C組caspase-3活性顯著降低(445155.1±569